目的探究上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體在BCG（卡介苗）感染巨噬細(xì)胞產(chǎn)生炎性反應(yīng)中的調(diào)控作用。方法本研究通過(guò)試劑盒提取經(jīng)BCG感染及未感染的人正常上皮細(xì)胞中的外泌體并對(duì)其進(jìn)行鑒定;將用染料標(biāo)記的外泌體與巨噬細(xì)胞共孵育觀察與巨噬細(xì)胞的作用過(guò)程;ELISA方法檢測(cè)外泌體刺激后巨噬細(xì)胞上清中炎性因子IL-6、IL-1β的含量;蛋白免疫印跡法檢測(cè)巨噬細(xì)胞中TLR2、TLR4、TLR6、MyD88、NF-κВ及TRAF6蛋白的表達(dá)。結(jié)果純化獲得的外泌體在電鏡下呈茶托狀,大小在30～100 nm;并表達(dá)外泌體的表面分子標(biāo)志CD9、HSP70;DIR紅色染料標(biāo)記的外泌體被巨噬細(xì)胞吞噬進(jìn)入胞內(nèi);經(jīng)外泌體刺激能夠顯著增加巨噬細(xì)胞分泌的炎性因子IL-6、IL-1β（P<0.001）;且與BCG單獨(dú)處理組比較,無(wú)論BCG預(yù)處理上皮細(xì)胞或未處理的外泌體都能進(jìn)一步升高BCG誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞分泌炎性因子水平（P<0.05）;同時(shí)TLR信號(hào)TLR2、TLR4、TLR6以及MyD88、NF-κВ、TRAF6蛋白在巨噬細(xì)胞受外泌體刺激后表達(dá)均顯著上調(diào)（P<0.05）。結(jié)論上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體通過(guò)激活TLR/MyD... 

【文章來(lái)源】：免疫學(xué)雜志. 2020,36(03)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

BEAS-2B細(xì)胞來(lái)源的外泌體的形態(tài)觀察及鑒定

巨噬細(xì)胞炎性因子的表達(dá)

為了研究外泌體通過(guò)何種途徑對(duì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)進(jìn)行調(diào)控，我們檢測(cè)了TLR/MyD88依賴性信號(hào)通路中MyD88、TRAF6和NF-κВ的表達(dá)情況。Western blot檢測(cè)結(jié)果如圖4所示，與空白對(duì)照組比較，外泌體（-）處理組與外泌體（+）處理組的NF-κВ、MyD88、TRAF6的表達(dá)量均上調(diào)（P<0.001）；與BCG單獨(dú)處理組相比，經(jīng)外泌體（-）+BCG組與外泌體（+）+BCG組刺激過(guò)的巨噬細(xì)胞MyD88、TRAF6、NF-κВ的表達(dá)量顯著升高（P<0.05）。表明外泌體可增強(qiáng)巨噬細(xì)胞TLR/MyD88依賴性信號(hào)通路中MyD88、TRAF6、NF-κВ蛋白的表達(dá)。圖4 外泌體刺激巨噬細(xì)胞后MyD88、NF-κВ、TRAF6的表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3619345