目的:采用改良水平臺(tái)法構(gòu)建成年大鼠脾切除術(shù)術(shù)后睡眠剝奪模型,探索麻醉、手術(shù)、睡眠剝奪對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響,以及IL-6和Tau-ser396在睡眠剝奪前后的表達(dá)差異。方法:80只健康成年SD大鼠（200-200g,6-7W）在施加干預(yù)前進(jìn)行Y-迷宮行為學(xué)測(cè)試,將學(xué)會(huì)的大鼠用隨機(jī)數(shù)字法分成空白組（C組,n=10）、麻醉組（A組,n=10）、手術(shù)組（S組,n=10）、睡眠剝奪組（SD組,n=10）、麻醉+睡眠剝奪組（ASD,n=10）,手術(shù)+睡眠剝奪組（SSD,n=10）,隨后繼續(xù)測(cè)試3天后給予對(duì)應(yīng)處置,次日采用改良多平臺(tái)法行睡眠剝奪,在術(shù)后的第3、5、7天繼續(xù)進(jìn)行Y-迷宮測(cè)試,對(duì)比各組大鼠學(xué)力習(xí)記憶能力改變。WB檢測(cè)各組IL-6、Tau-ser 396蛋白的相對(duì)表達(dá)水平,免疫熒光雙染確定IL-6和Tau-ser396的位置關(guān)系。結(jié)果:在施加干預(yù)前,各組Y-迷宮測(cè)試結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,在術(shù)后第3、7天,各組犯錯(cuò)次數(shù)明顯高于空白組（P均<0.05）,復(fù)合睡眠剝奪組的大鼠犯錯(cuò)次數(shù)明顯低于單獨(dú)的手術(shù)/麻醉組（P均<0.05）。Western blot結(jié)果顯示,A組、S組、SD組、A... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：37 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

實(shí)驗(yàn)流程圖

圖 2 大鼠 Y-迷宮行為學(xué)測(cè)試實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖 A 代表大鼠在施加干預(yù)前后行為學(xué)測(cè)試結(jié)果，其中 B1 表示術(shù)前第 1 天，B2 表示術(shù)前第 2 天B3 表示術(shù)前第 3 天，A3 表示術(shù)后第 3 天，A5 表示術(shù)后第 5 天，A7 表示術(shù)后第 7 天，采用 two-wANOVA 方法分析，* 表示與空白組對(duì)比，P＜0.05，# 與麻醉組對(duì)比，P＜0.05，&表示與手組對(duì)比，P＜0.05。圖 B 表示各組犯錯(cuò)次數(shù)在時(shí)間上的變化，數(shù)據(jù)為各組均數(shù)。3.2 Western Blot 結(jié)果與空白組對(duì)比，其余各組 IL-6、Tau-ser396 相對(duì)表達(dá)量明顯升高，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。手術(shù)組 IL-6 蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯高于麻醉組、睡眠剝奪組（P＜0.01），麻醉組 IL-6 蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯睡眠剝奪組（P＜0.001）；麻醉+睡眠剝奪組大鼠的 IL-6 蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯低于麻醉組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）手術(shù)+睡眠剝奪組的 IL-6 蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯低于手術(shù)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.01）（圖 3 B）。

圖 3 大鼠海馬組織 Western blot 實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖 A 表示 6 組大鼠 IL-6 和 tau-ser396 條帶圖；圖 B 表示 6 組大鼠 IL-6 蛋白含量，圖 C 表示 6組大鼠 Tau-ser396 蛋白含量，數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示（n=3）。采用 One-wayANOVA 進(jìn)行多組比較。* 表示與空白組對(duì)比，* P＜0.05，** P＜0.01，# 與麻醉組對(duì)比，# P＜0.05，## P＜0.01，### P＜0.001，& 表示與手術(shù)組對(duì)比，& P＜0.05，&& P＜0.01，&&&& P＜0.0001。3.3 免疫熒光雙染結(jié)果利用免疫熒光雙染技術(shù)觀察各組大鼠海馬組織中 IL-6 和 Tau-ser 396 的定位情況。結(jié)果顯示，在手術(shù)+睡眠剝奪組的大鼠海馬組織中，可以觀察到 IL-6 和 Tau-ser396 共定位表達(dá)。結(jié)合 Western blot 變化趨勢(shì)，提示 IL-6 可能通過(guò)某種機(jī)制參與到Tau-ser396 磷酸化過(guò)程中。


本文編號(hào)：3569600