目的:采用改良水平臺法構建成年大鼠脾切除術術后睡眠剝奪模型,探索麻醉、手術、睡眠剝奪對大鼠學習記憶能力的影響,以及IL-6和Tau-ser396在睡眠剝奪前后的表達差異。方法:80只健康成年SD大鼠（200-200g,6-7W）在施加干預前進行Y-迷宮行為學測試,將學會的大鼠用隨機數(shù)字法分成空白組（C組,n=10）、麻醉組（A組,n=10）、手術組（S組,n=10）、睡眠剝奪組（SD組,n=10）、麻醉+睡眠剝奪組（ASD,n=10）,手術+睡眠剝奪組（SSD,n=10）,隨后繼續(xù)測試3天后給予對應處置,次日采用改良多平臺法行睡眠剝奪,在術后的第3、5、7天繼續(xù)進行Y-迷宮測試,對比各組大鼠學力習記憶能力改變。WB檢測各組IL-6、Tau-ser 396蛋白的相對表達水平,免疫熒光雙染確定IL-6和Tau-ser396的位置關系。結果:在施加干預前,各組Y-迷宮測試結果無統(tǒng)計學差異,在術后第3、7天,各組犯錯次數(shù)明顯高于空白組（P均<0.05）,復合睡眠剝奪組的大鼠犯錯次數(shù)明顯低于單獨的手術/麻醉組（P均<0.05）。Western blot結果顯示,A組、S組、SD組、A... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：37 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

實驗流程圖

圖 2 大鼠 Y-迷宮行為學測試實驗結果圖 A 代表大鼠在施加干預前后行為學測試結果，其中 B1 表示術前第 1 天，B2 表示術前第 2 天B3 表示術前第 3 天，A3 表示術后第 3 天，A5 表示術后第 5 天，A7 表示術后第 7 天，采用 two-wANOVA 方法分析，* 表示與空白組對比，P＜0.05，# 與麻醉組對比，P＜0.05，&表示與手組對比，P＜0.05。圖 B 表示各組犯錯次數(shù)在時間上的變化，數(shù)據(jù)為各組均數(shù)。3.2 Western Blot 結果與空白組對比，其余各組 IL-6、Tau-ser396 相對表達量明顯升高，其差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。手術組 IL-6 蛋白相對表達量明顯高于麻醉組、睡眠剝奪組（P＜0.01），麻醉組 IL-6 蛋白相對表達量明顯睡眠剝奪組（P＜0.001）；麻醉+睡眠剝奪組大鼠的 IL-6 蛋白相對表達量明顯低于麻醉組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）手術+睡眠剝奪組的 IL-6 蛋白相對表達量明顯低于手術組，差異有統(tǒng)計學意義（＜0.01）（圖 3 B）。

圖 3 大鼠海馬組織 Western blot 實驗結果圖 A 表示 6 組大鼠 IL-6 和 tau-ser396 條帶圖；圖 B 表示 6 組大鼠 IL-6 蛋白含量，圖 C 表示 6組大鼠 Tau-ser396 蛋白含量，數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差表示（n=3）。采用 One-wayANOVA 進行多組比較。* 表示與空白組對比，* P＜0.05，** P＜0.01，# 與麻醉組對比，# P＜0.05，## P＜0.01，### P＜0.001，& 表示與手術組對比，& P＜0.05，&& P＜0.01，&&&& P＜0.0001。3.3 免疫熒光雙染結果利用免疫熒光雙染技術觀察各組大鼠海馬組織中 IL-6 和 Tau-ser 396 的定位情況。結果顯示，在手術+睡眠剝奪組的大鼠海馬組織中，可以觀察到 IL-6 和 Tau-ser396 共定位表達。結合 Western blot 變化趨勢，提示 IL-6 可能通過某種機制參與到Tau-ser396 磷酸化過程中。


本文編號：3569600