目的:建立SD大鼠1型單純皰疹病毒（HSV-1）三叉神經(jīng)節(jié)潛伏感染和再激活的動(dòng)物模型,利用痛閾檢測(cè)觀察HSV-1神經(jīng)節(jié)感染和再激活對(duì)三叉神經(jīng)痛閾的影響。方法:SD大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組角膜劃痕滴加HSV-1接種病毒,建立神經(jīng)節(jié)潛伏感染模型;對(duì)照組僅滴加生理鹽水。8周后,再將實(shí)驗(yàn)組大鼠分為紫外照射組和非紫外照射組,實(shí)施紫外線照射,干預(yù)誘導(dǎo)潛伏感染再激活。利用Von Frey纖維絲測(cè)痛儀檢測(cè)各組大鼠觸須墊機(jī)械痛閾。提取大鼠三叉神經(jīng)節(jié)組織,RT-PCR檢測(cè)HSV-GD、LAT、ICP27的表達(dá)水平,驗(yàn)證HSV-1神經(jīng)節(jié)潛伏感染和再激活是否成功。結(jié)果:大鼠HSV-1神經(jīng)節(jié)潛伏感染和再激活成功;實(shí)驗(yàn)組大鼠在HSV-1潛伏感染狀態(tài)下和再激活狀態(tài)下,發(fā)生疼痛刺激樣反應(yīng),痛閾有降低趨勢(shì),尤其在再激活后更加明顯。結(jié)論:三叉神經(jīng)節(jié)HSV-1潛伏感染再激活可以誘發(fā)動(dòng)物三叉神經(jīng)痛閾降低,提示HSV-1可能是三叉神經(jīng)痛的病因。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)口腔頜面外科雜志. 2020,18(03)

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【部分圖文】：

實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組在潛伏感染狀態(tài)下的疼痛閾值變化

實(shí)驗(yàn)第8周后，照射紫外線處理誘發(fā)HSV-1再激活后7、14、21、28 d，紫外線實(shí)驗(yàn)組的痛閾有明顯下降趨勢(shì)，而其余3組的痛閾均無(wú)顯著變化（圖2）。2.2 對(duì)潛伏感染及潛伏感染再激活建立的驗(yàn)證

許多研究者曾嘗試建立HSV-1潛伏感染動(dòng)物模型，目前所用動(dòng)物主要是小鼠和家兔。但是病毒會(huì)在小鼠的三叉神經(jīng)節(jié)發(fā)生裂解感染，在神經(jīng)元內(nèi)大量復(fù)制，導(dǎo)致被感染的神經(jīng)元死亡，實(shí)驗(yàn)小鼠多半死亡，極大影響了實(shí)驗(yàn)后續(xù)進(jìn)展。而家兔體積過(guò)大，操作不便[6]。本實(shí)驗(yàn)嘗試選擇大鼠作為對(duì)象，建立一種更為簡(jiǎn)單可靠的HSV-1感染三叉神經(jīng)節(jié)動(dòng)物模型。驗(yàn)證HSV-1潛伏感染以及潛伏感染再激活建立的分子標(biāo)志主要有HSV-gD、LAT及ICP27，其中，HSV-gD是免疫原性最強(qiáng)的抗原蛋白[7]，在潛伏感染期不表達(dá)，再激活后表達(dá)。LAT是潛伏相關(guān)轉(zhuǎn)錄子，HSV-1處于潛伏期時(shí)無(wú)蛋白表達(dá)，只能轉(zhuǎn)錄包括LAT相關(guān)的RNA和其他非編碼RNA,LAT是潛伏感染的標(biāo)志物[1,8]。ICP27表達(dá)于病毒復(fù)制早期，通過(guò)多種機(jī)制激活病毒早期及晚期基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，是病毒增殖和復(fù)制必需的關(guān)鍵因子，在病毒感染過(guò)程中發(fā)揮不同的作用，代表病毒潛伏感染再激活的開(kāi)始[9-10]。本研究通過(guò)RT-PCR檢測(cè)到ICP27的表達(dá)，表明HSV-1已經(jīng)成功在大鼠三叉神經(jīng)節(jié)中建立潛伏感染。但由于本研究所用的模型動(dòng)物為SD大鼠，有出現(xiàn)自發(fā)性再激活的可能，檢測(cè)到HSV-gD、LAT可能是神經(jīng)節(jié)組織中同時(shí)存在潛伏感染和部分病毒基因的自發(fā)性再激活[11]；在進(jìn)行紫外線照射后，檢測(cè)到HSV-GD、ICP27基因的表達(dá)而沒(méi)有LAT基因的表達(dá)，證明三叉神經(jīng)節(jié)中的HSV-1被成功激活。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3550252