背景:大量研究證明低氧可以促進(jìn)干細(xì)胞的增殖和分化,但目前尚不清楚其通過何種途徑發(fā)揮作用。目的:觀察低氧對脂肪干細(xì)胞增殖和向內(nèi)皮細(xì)胞分化的影響,并探討PI3K/Akt通路在此過程中的作用。方法:取培養(yǎng)至第3代的Wistar大鼠脂肪干細(xì)胞,分為常氧組、低氧組、低氧+LY294002組,3組均在體積分?jǐn)?shù)為20%O₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,然后低氧組轉(zhuǎn)移至體積分?jǐn)?shù)為2%O₂培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),常氧組繼續(xù)在體積分?jǐn)?shù)為20%O₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng),低氧+LY294002組在低氧培養(yǎng)環(huán)境下的細(xì)胞培養(yǎng)基中加入終濃度為25mmol/L的PI3K/Akt通路抑制劑LY294002。培養(yǎng)24 h后,Western blot檢測p-Akt的表達(dá)明確PI3K/Akt通路的激活情況;CCK-8法檢測各組脂肪干細(xì)胞的增殖情況;各組脂肪干細(xì)胞加入血管內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)基進(jìn)行誘導(dǎo)分化10 d,分別通過q RT-PCR及抗CD31免疫熒光染色檢測各組脂肪干細(xì)胞分化為內(nèi)皮細(xì)胞的情況。結(jié)果與結(jié)論:①第3代脂肪干細(xì)胞呈現(xiàn)出典型的梭形結(jié)構(gòu),流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示CD34和CD... 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2020,24(19)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

第3代Wistar大鼠脂肪干細(xì)胞的形態(tài)及流式鑒定結(jié)果

Western blot檢測各組脂肪干細(xì)胞中p-Akt的表達(dá)

q RT-PCR檢測誘導(dǎo)培養(yǎng)10 d后各組內(nèi)皮細(xì)胞特異性基因的表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Combination of mild therapeutic hypothermia and adipose-derived stem cells for ischemic brain injury[J]. Kai Zhao,Rui Li,Sheng Bi,Yu Li,Long Liu,Yu-Long Jia,Peng Han,Chang-Cong Gu,Xi-Ze Guo,Wan-Ping Zhang,Chun Wang,Chun-Ying Pei,Lin-Lu Tian,Li-Xian Li.  Neural Regeneration Research. 2018(10)
[2]大鼠脂肪干細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向內(nèi)皮分化的能力比較[J]. 范麗君,肖倩蓉,林凱桑,王思妤,李章芳,李晨鐘,張彤,韓亞娟,沈潔.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(09)



本文編號：3517330