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小鼠胚胎干細胞定向血管內(nèi)皮和造血細胞分化體系的建立

發(fā)布時間:2021-11-18 02:38
  研究背景:在血管發(fā)生和重塑的過程中,血管內(nèi)皮細胞(endothelial cell,EC)起源于血液血管母細胞(hemangioblast,HA)。但由于缺乏對這一發(fā)育過程諸多細節(jié)的深入了解,因而成熟的血管內(nèi)皮在體外擴增十分困難,極大地限制了它的功能研究和臨床應(yīng)用。近年來,多項研究表明哺乳動物成體血管內(nèi)皮中存在一群具有特定分子表型的“血管內(nèi)皮干細胞(vascular endothelial stem cell,VESC)”,表達Kit(也稱CD117)、Procr(也稱EPCR、CD201)等分子,能在體外形成穩(wěn)定克隆并產(chǎn)生數(shù)千萬的子代內(nèi)皮細胞。不僅如此,VESC還具有分化為原代內(nèi)皮細胞和周細胞的雙向潛能,可以在體內(nèi)產(chǎn)生功能性血管,這為組織工程化血管和臨床治療提供了新的研究方向。造血細胞(hematopoietic cell,HC)的起源與血管內(nèi)皮密不可分。目前的主流觀點認為,造血細胞是由中胚層來源、功能特化的生血內(nèi)皮(hematopoietic endothelium,HE)通過內(nèi)皮-造血轉(zhuǎn)化(endothelial to hematopoietic cell transition,... 

【文章來源】:軍事科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】:84 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

小鼠胚胎干細胞定向血管內(nèi)皮和造血細胞分化體系的建立


胚胎干細胞向中胚層祖細胞誘導(dǎo)分化流程圖

胚胎干細胞,界限,子培


霉素 C 處理過,因而復(fù)蘇后不再分裂增殖,情況 次性復(fù)蘇 2 管 MEF,以維持飼養(yǎng)層細不規(guī)則克隆增殖,當 MEF 密度較大時,ESC折光率低),與周圍細胞界限清楚。ESC 般 3×105/孔),傳代時須復(fù)蘇新的 MEF 以維持 MEF 起消化凍存,再次復(fù)蘇使用時仍需加入干細胞誘導(dǎo) 4 天后形成大量擬胚體克隆細胞系 R1/E 于 6 孔板內(nèi)復(fù)蘇 2d 后,細胞正Petri dish 中改用無血清的 StemPro+四因子培養(yǎng)導(dǎo) ESC 向中胚層細胞 EB 分化。前 2 天不換擬胚體以肉眼可見的速度迅速增殖,細胞間粘,折光性強,與周圍界限清晰,且無自發(fā)分化我們的無血清培養(yǎng)基配合四因子的誘導(dǎo)體系成功內(nèi)皮和造血細胞誘導(dǎo)分化奠定了基礎(chǔ)。

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擬胚體定向內(nèi)皮細胞誘導(dǎo)分化流程圖


本文編號:3502038

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