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病理組織PAS染色影響因素分析

發(fā)布時(shí)間:2021-11-15 06:34
  目的分析病理組織過(guò)碘酸雪夫氏(periodic acid Schiff, PAS)染色的影響因素,以期提高其染色效果。方法選取已知含有PAS陽(yáng)性物質(zhì)的胃粘膜組織,分別制作成蠟塊,通過(guò)對(duì)比試驗(yàn),比較高碘酸水溶液不同染色時(shí)長(zhǎng)、雪夫氏(Schiff)試劑不同配制方法、Schiff試劑不同保存時(shí)間對(duì)PAS染色質(zhì)量的影響。結(jié)果胃粘膜組織在使用高碘酸水溶液染色11~15min優(yōu)于其他時(shí)長(zhǎng),Schiff試劑熱配法優(yōu)于冷配法,試劑保存2個(gè)月內(nèi)的染色效果優(yōu)于試劑保存大于2個(gè)月者。結(jié)論胃粘膜組織使用高碘酸水溶液染色11~15min、熱配法配制的Schiff試劑、保存在2個(gè)月內(nèi)的Schiff試劑進(jìn)行染色效果最佳。 

【文章來(lái)源】:中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志. 2020,29(01)CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】:4 頁(yè)

【部分圖文】:

病理組織PAS染色影響因素分析


高碘酸水溶液不同氧化時(shí)長(zhǎng)染色效果比較。

試劑,碘酸,效果,方法


雪夫氏(Schiff)試劑不同配制方法染色比較。

試劑,碘酸,堿性


許多學(xué)者在PAS染色中也對(duì)高碘酸的氧化時(shí)間做了探討。高碘酸也稱(chēng)過(guò)碘酸,Lyon等[4]提倡10g/L過(guò)碘酸氧化60min。祁珊珊[5]認(rèn)為氧化時(shí)間應(yīng)控制在10min以?xún)?nèi),環(huán)境溫度不宜超過(guò)20℃,若室溫高時(shí)可縮短氧化時(shí)間。作者在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),高碘酸氧化時(shí)間不足,會(huì)影響后續(xù)Schiff試劑染色結(jié)果。高碘酸通常存貯于4℃冰箱,待染色時(shí)將其取出,需恢復(fù)至室溫,氧化11~15min,能夠充分氧化組織中的糖類(lèi)及有關(guān)物質(zhì)。環(huán)境中的溫度也影響氧化效果,周?chē)h(huán)境溫度低時(shí)可適當(dāng)延長(zhǎng)氧化時(shí)間,如果周?chē)鷾囟雀咔易饔脮r(shí)間長(zhǎng)可出現(xiàn)非特異性染色,使染色結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性。Schiff試劑的配制方法很多,其基本原理都是將堿性品紅經(jīng)偏重亞硫酸鈉等作用,變成無(wú)色產(chǎn)物,即為Schiff試劑,故較為理想的Schiff試劑應(yīng)為無(wú)色透明溶液。其質(zhì)量主要取決于所用試劑堿性品紅的質(zhì)量,因此,在配制Schiff試劑時(shí)堿性品紅的質(zhì)量一定要純,堿性品紅有不同的廠牌和批號(hào),純度較高的可以少加活性炭,配制中所用的玻璃器皿要求十分干凈[6]。堿性品紅微溶于水,溶于乙醇和酸。堿性品紅中的醛式結(jié)構(gòu)是顯色的關(guān)鍵。Schiff試劑的配制方法有熱配法和冷配法。熱配法采用加熱煮沸的方法,可以通過(guò)加快分子之間的運(yùn)動(dòng)從而加速溶解和脫色;冷配法采用室溫振蕩、攪拌的方法,原理是增加分子之間的碰撞,促進(jìn)染料的溶解與脫色。熱配法促進(jìn)堿性品紅溶解,溫度降到50℃的時(shí)候加入稀酸再攪拌,使其溶解的更為徹底,且能讓反應(yīng)更為穩(wěn)定,與組織中的醛基結(jié)合更好。冷配法因?yàn)闆](méi)有加熱,堿性品紅溶解不充分,影響了染色效果,縮短了試劑有效期。


本文編號(hào):3496233

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