多聚嘧啶序列結(jié)合蛋白在骨髓間充質(zhì)干細胞成骨分化過程中的作用
發(fā)布時間:2021-11-04 07:06
目的明確多聚嘧啶序列結(jié)合蛋白(polypyrimidine tract binding protein, PTB)在正常人和骨質(zhì)疏松大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)成骨分化中的作用及其機制。方法收集中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院整形外科醫(yī)院收治的4例齒槽嵴裂患兒術(shù)后廢棄骨髓血,原代分離培養(yǎng)人BMSCs并誘導(dǎo)分化為成骨細胞,RT-PCR和蛋白質(zhì)印跡法檢測PTB在誘導(dǎo)分化7 d和14 d的表達水平;應(yīng)用shRNA技術(shù)對人BMSCs中PTB的表達進行敲減,茜素紅染色和熒光定量PCR評價其對成骨分化的影響;體外分別應(yīng)用濃度為10 ng/ml和40 ng/ml的腫瘤壞死因子α(TNF-α) 處理人BMSCs,熒光定量PCR和茜素紅染色檢測其對PTB表達及成骨分化能力的影響;流式細胞術(shù)檢測人BMSCs經(jīng)PTB敲減后細胞內(nèi)活性氧(ROS)含量。10只6個月齡雌性SD大鼠采用隨機數(shù)字表法隨機分為卵巢切除骨質(zhì)疏松模型組和假手術(shù)組,每組5只,熒光定量PCR檢測其BMSCs中PTB的表達變化。各項定量數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準差表示,2組間比較應(yīng)用t檢驗,P&...
【文章來源】:中華整形外科雜志. 2020,36(05)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:9 頁
本文編號:3475244
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