<正>目的為深入探索Rtn4-A/B基因的生物學功能,擬制備Rtn4-A/B基因敲除小鼠。方法采用RED/ET克隆方法,使用細菌人工染色體（BAC）載體構(gòu)建Rtn4-A/B基因打靶載體并使其線性化,通過電轉(zhuǎn)化法將其轉(zhuǎn)入129小鼠胚胎干細胞（ES細胞）。將正確同源重組的ES細胞注射入C57BL/6J小鼠囊胚腔,繁育出嵌合體小鼠后,進一步繁殖以獲得雜合子小鼠。抽提小鼠尾尖組織DNA,采用PCR法鑒定小鼠的基因型。結(jié)果基因打靶后,得到15個發(fā)生雙臂正確同源重組ES細胞克隆。利用陽性ES細胞克隆進行囊胚內(nèi)顯微注射,得到5只嵌合率大于50%的雄鼠,最終繁育得到4只 

【文章來源】：中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2013第十四次全國呼吸病學學術(shù)會議論文匯編中華醫(yī)學會會議論文集

【文章頁數(shù)】：1 頁


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