目的比較3種不同密度梯度離心方法對(duì)脊髓灰質(zhì)炎病毒空心顆粒、實(shí)心顆粒的分離效果。方法選擇蔗糖密度梯度離心、氯化銫密度梯度離心、Optiprep（碘克沙醇溶液）密度梯度離心方法,對(duì)脊髓灰質(zhì)炎病毒進(jìn)行純化,抽取離心之后的蛋白條帶,通過計(jì)算蛋白回收率、SDS-PAGE分析、病毒顆粒透射電鏡觀察,評(píng)價(jià)其對(duì)病毒空心顆粒、實(shí)心顆粒的分離效果。結(jié)果病毒液經(jīng)蔗糖、氯化銫和Optiprep 3種介質(zhì)超速離心,均能分離空心顆粒和實(shí)心顆粒。氯化銫密度梯度離心法蛋白回收率優(yōu)于Optiprep及蔗糖密度梯度離心法;Optiprep密度梯度離心法蛋白純度優(yōu)于氯化銫及蔗糖密度梯度離心法。結(jié)論通過蛋白回收率、SDS-PAGE分析、病毒顆粒透射電鏡觀察初步評(píng)價(jià)了3種方法對(duì)脊髓灰質(zhì)炎病毒空心顆粒和實(shí)心顆粒的分離效果,為脊髓灰質(zhì)炎病毒分離純化提供了參考。 

【文章來源】：中國生物制品學(xué)雜志. 2020,33(03)CSCD

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

病毒液經(jīng)3種介質(zhì)超速離心分離條帶

BCA法檢測蛋白含量標(biāo)準(zhǔn)曲線

選擇Optiprep密度梯度離心法分離的上、中、下層病毒液進(jìn)行透射電鏡觀察，結(jié)果顯示，上層、中層為不完整的病毒顆粒，即空心顆粒，下層為完整的病毒顆粒，即實(shí)心顆粒，且病毒顆粒純度較高，見圖4。圖4 Optipre分離后的空心顆粒（A）及實(shí)心顆粒（B）的透射電鏡觀察

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]三種常用的密度梯度離心方法富集有核紅細(xì)胞的比較[J]. 隋玉杰,李凌云,吳飛,杜珍武,楊麒巍,張桂珍,宋旸.  中國體視學(xué)與圖像分析. 2018(03)
[2]脊髓灰質(zhì)炎2型病毒樣顆粒在畢赤酵母內(nèi)的表達(dá)與鑒定[J]. 趙輝,溫曄,彭少丹,晏巧玲,馬金,朱濤.  微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展. 2018(04)
[3]蔗糖密度梯度離心技術(shù)純化山羊痘病毒的研究[J]. 高順平,吳國華,顏新敏,趙志荀,張強(qiáng).  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2018(11)
[4]Optiprep連續(xù)密度梯度離心方法的建立[J]. 張輝,畢研偉,李智華,李亞東,宮悅,寸韡.  生物技術(shù)通訊. 2016(06)
[5]蔗糖密度梯度離心法純化流感病毒工藝的優(yōu)化[J]. 顧建陽,劉旭光,郭占龍,孫志偉,杜金東,徐文,孫宇,曹海丹,劉燕,曾亮,王思燕,王亞軍.  中國生物制品學(xué)雜志. 2015(08)
[6]人呼吸道合胞病毒不同純化方法的比較研究[J]. 董莉娟,李華,蔣蕊鞠,楊蓉,龍潤?quán)l(xiāng),白慧珠,崔萍芳,楊婷,謝忠平.  醫(yī)學(xué)研究雜志. 2011(04)
[7]密度梯度離心法純化地鼠腎細(xì)胞狂犬病疫苗[J]. 魯宏,竇志勇.  中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2000(02)



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