人呼吸道合胞病毒（Human respiratory syncytial virus,hRSV）是嬰幼兒和老年人發(fā)生嚴重呼吸道疾病的主要病因,自上世紀50年代hRSV被發(fā)現(xiàn)以來,科學家對hRSV疫苗進行了大量的實驗探索,但至今沒有上市的疫苗。本研究應用pET32a質(zhì)粒在大腸桿菌BL21中表達并純化了hRSV F蛋白（RBF）,透射電鏡下RBF以三聚體的形式存在（長約20 nm的棒狀結(jié)構(gòu)）,與5C4抗體（識別抗原表位?）親和常數(shù)為1.26×10^-9�；旌箱X佐劑肌肉注射免疫BALB/c小鼠,不同劑量（2.5μg、5μg和10μg）的RBF蛋白免疫效果無顯著差異（P>0.05）,均能誘導小鼠產(chǎn)生高滴度的中和抗體（滴度可達2⁷）,并且可以顯著降低肺臟病毒滴度,減少肺臟的病理損傷（P<0.001）。與福爾馬林滅活疫苗（FI-RSV）相比,RBF誘導產(chǎn)生偏向Th1類的細胞和體液免疫應答。RBF在動物實驗中顯示出良好的保護效果,同時原核表達系統(tǒng)具有產(chǎn)量和成本上的優(yōu)勢,因此可以作為預防人感染hRSV的潛在候選疫苗。 

【文章來源】：病毒學報. 2020,36(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：9 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1細胞、病毒和倫理
    2主要試劑
    3 RBF蛋白的表達和純化驗證
    4免疫策略
    5血清抗體與肺臟病毒測定
    6ELISPOT分析和肺臟組織蘇木精和伊紅（Hematoxylin and eosin,HE）染色
    7統(tǒng)計學分析
結(jié)果
    1 RBF蛋白純化與構(gòu)象鑒定
    2RBF誘導小鼠產(chǎn)生中和抗體，降低肺臟病毒滴度
    3 RBF誘導產(chǎn)生Th1類的免疫應答
    4 RBF蛋白減少肺臟病理損傷
討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]人呼吸道合胞病毒FHRA-HRB片段的表達純化與鑒定[J]. 夏超,沈良華,李滿妹,唐維,易善澤,牛得偉,王峰,李藥蘭.  暨南大學學報(自然科學與醫(yī)學版). 2017(04)
[2]人呼吸道合胞病毒截短F1蛋白的原核表達及其免疫原性評價[J]. 李華,楊婷,岳磊,何曉娟,朱凡麗,謝天宏,龍潤?quán)l(xiāng),楊蓉,羅芳宇,謝忠平.  中國生物制品學雜志. 2017(01)
[3]呼吸道合胞病毒F蛋白基因片段原核表達和初步應用[J]. 蘆起,申昆玲,許文波,劉中華,朱貞,毛乃穎,楊錫強,余加林,王家蓉,王穎.  第四軍醫(yī)大學學報. 2009(21)



本文編號：3438234