人呼吸道合胞病毒（Human respiratory syncytial virus,hRSV）是嬰幼兒和老年人發(fā)生嚴(yán)重呼吸道疾病的主要病因,自上世紀(jì)50年代hRSV被發(fā)現(xiàn)以來(lái),科學(xué)家對(duì)hRSV疫苗進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)探索,但至今沒(méi)有上市的疫苗。本研究應(yīng)用pET32a質(zhì)粒在大腸桿菌BL21中表達(dá)并純化了hRSV F蛋白（RBF）,透射電鏡下RBF以三聚體的形式存在（長(zhǎng)約20 nm的棒狀結(jié)構(gòu)）,與5C4抗體（識(shí)別抗原表位?）親和常數(shù)為1.26×10^-9�；旌箱X佐劑肌肉注射免疫BALB/c小鼠,不同劑量（2.5μg、5μg和10μg）的RBF蛋白免疫效果無(wú)顯著差異（P>0.05）,均能誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生高滴度的中和抗體（滴度可達(dá)2⁷）,并且可以顯著降低肺臟病毒滴度,減少肺臟的病理?yè)p傷（P<0.001）。與福爾馬林滅活疫苗（FI-RSV）相比,RBF誘導(dǎo)產(chǎn)生偏向Th1類的細(xì)胞和體液免疫應(yīng)答。RBF在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中顯示出良好的保護(hù)效果,同時(shí)原核表達(dá)系統(tǒng)具有產(chǎn)量和成本上的優(yōu)勢(shì),因此可以作為預(yù)防人感染hRSV的潛在候選疫苗。 

【文章來(lái)源】：病毒學(xué)報(bào). 2020,36(04)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：9 頁(yè)

【文章目錄】：
材料與方法
    1細(xì)胞、病毒和倫理
    2主要試劑
    3 RBF蛋白的表達(dá)和純化驗(yàn)證
    4免疫策略
    5血清抗體與肺臟病毒測(cè)定
    6ELISPOT分析和肺臟組織蘇木精和伊紅（Hematoxylin and eosin,HE）染色
    7統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    1 RBF蛋白純化與構(gòu)象鑒定
    2RBF誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生中和抗體，降低肺臟病毒滴度
    3 RBF誘導(dǎo)產(chǎn)生Th1類的免疫應(yīng)答
    4 RBF蛋白減少肺臟病理?yè)p傷
討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人呼吸道合胞病毒FHRA-HRB片段的表達(dá)純化與鑒定[J]. 夏超,沈良華,李滿妹,唐維,易善澤,牛得偉,王峰,李藥蘭.  暨南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版). 2017(04)
[2]人呼吸道合胞病毒截短F1蛋白的原核表達(dá)及其免疫原性評(píng)價(jià)[J]. 李華,楊婷,岳磊,何曉娟,朱凡麗,謝天宏,龍潤(rùn)?quán)l(xiāng),楊蓉,羅芳宇,謝忠平.  中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2017(01)
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