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SIK-2對(duì)腦缺血再灌注損傷的影響及機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-10-08 20:34
  目的:明確SIK2在腦缺血再灌注損傷過程中的作用,闡明SIK2參與調(diào)控腦缺血再灌注損傷后血管再生的分子機(jī)制。方法:利用PSI血流灌注儀輔助建立大鼠腦缺血再灌注損傷模型,將實(shí)驗(yàn)大鼠分為Control組、缺血2h組、缺血再灌3h組、6h組、12h組、24h組、48h組,Q-PCR和Western-blot檢測(cè)SIK2的表達(dá)量。腺病毒腦部立體定位注射構(gòu)建SIK2過表達(dá)動(dòng)物,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組為:Control、Control+hSIK2、MCAO、MCAO+hSIK2。TTC染色檢測(cè)各組大鼠腦組織梗死情況;伊文思藍(lán)染色觀察各組大鼠腦組織水腫程度和血腦屏障損傷情況;免疫熒光標(biāo)記CD31觀察各組大鼠側(cè)枝循環(huán)血管再生情況;Western-blot檢測(cè)各組大鼠腦組織中SIK2、CREB、pCREB、VEGF蛋白質(zhì)的表達(dá)情況。結(jié)果:1.PSI血流灌注儀輔助建立大鼠腦缺血再灌注損傷模型及鑒定假手術(shù)組大鼠腦血流灌注圖像可以清晰的觀察到腦部血流灌注情況和血管分布,假手術(shù)組大鼠各項(xiàng)數(shù)據(jù)正常。MCAO組缺血2h,右側(cè)大腦中動(dòng)脈血流出現(xiàn)中斷,中動(dòng)脈供血區(qū)血流灌注量明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),恢復(fù)再... 

【文章來(lái)源】:皖南醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】:76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中英文縮略詞對(duì)照表
摘要
Abstract
前言
研究材料(資料、內(nèi)容)與方法
    1 研究材料
        1.1 研究對(duì)象
        1.2 實(shí)驗(yàn)材料
            1.2.1 主要試劑
            1.2.2 主要儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 利用PSI血流灌注儀建立大鼠腦缺血再灌注損傷模型[19]
        2.2 PSI實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)MCAO模型
        2.3 腦組織TTC染色計(jì)算腦梗死體積
        2.4 HE染色觀察腦組織病理學(xué)改變
        2.5 SIK2 過表達(dá)重組腺病毒轉(zhuǎn)染動(dòng)物構(gòu)建及鑒定
        2.6 Q-PCR檢測(cè)SIK2 m RNA的表達(dá)量
        2.7 免疫熒光標(biāo)記新生血管
            2.7.1 腦組織灌注固定
            2.7.2 免疫熒光標(biāo)記CD31
        2.8 Western blot檢測(cè)SIK2、CREB以及VEGF蛋白表達(dá)情
        2.9 伊文思藍(lán)(EB)檢測(cè)血腦屏障(BBB)通透性
    3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
    1 PSI腦血流灌注成像儀監(jiān)測(cè)結(jié)果
    2 各組腦組織TTC染色及梗死體積測(cè)定
    3 MCAO大鼠腦組織病理學(xué)改變
    4 SIK2 表達(dá)水平在腦缺血再灌注損傷發(fā)生時(shí)的變化趨勢(shì)
    5 SIK2 過表達(dá)大鼠模型的構(gòu)建及鑒定
    6 SIK2 過表達(dá)對(duì)大鼠腦梗死體積影響
    7 SIK2 過表達(dá)對(duì)大鼠血腦屏障的影響
    8 SIK2 過表達(dá)對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷后血管再生的影響
    9 在腦缺血再灌注損傷中SIK2 調(diào)控血管再生的機(jī)制
討論
    1 腦缺血再灌注損傷動(dòng)物模型的鑒定與評(píng)價(jià)
    2 SIK2 與腦缺血再灌注損傷之間的相關(guān)性
    3 腦缺血再灌注損傷與血管再生之間的相關(guān)性
展望
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 腦缺血再灌注損傷臨床治療的病理生理機(jī)制以及最新的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及讀研期間主要科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]PeriCam PSI血流灌注成像系統(tǒng)在腦缺血再灌注動(dòng)物模型中的應(yīng)用及評(píng)價(jià)[J]. 吳超,陳國(guó)仙,趙劉陽(yáng),李曙,洪云.  浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2018(01)
[2]Vascular endothelial growth factor: an attractive target in the treatment of hypoxic/ischemic brain injury[J]. Hui Guo,Hui Zhou,Jie Lu,Yi Qu,Dan Yu,Yu Tong.  Neural Regeneration Research. 2016(01)
[3]腦缺血再灌注動(dòng)物模型的制備及評(píng)價(jià)[J]. 馬志健,羅剛,易西南.  海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2009(06)
[4]三乙酰莽草酸對(duì)凝血酶和局灶性腦缺血再灌注誘導(dǎo)的血小板與白細(xì)胞粘附的作用及其機(jī)制(英文)[J]. 種兆忠,徐秋萍,孫建寧.  Acta Pharmacologica Sinica. 2001(08)
[5]Effect of mild hypothermia on the changes of cerebral blood flow,brain blood barrier and neuronal injuries following reperfusion of focal cerebral ischemia in rats[J]. 黃峰平,周良輔.  Chinese Medical Journal. 1998(04)



本文編號(hào):3424910

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