目的篩選與無形體Ats-1互作的THP-1宿主細胞蛋白,為揭示病原體侵襲宿主的致病機理提供科學數(shù)據(jù)。方法利用分子克隆法構建p GBKT7-ats-1誘餌質粒并轉化酵母Y2HGold,驗證誘餌質粒是否有自激活、毒性現(xiàn)象;制備THP-1細胞c DNA并連接到p GADT7-Rec上,轉化酵母Y187并鑒定c DNA文庫質量;酵母雙雜交篩選與Ats-1互作的宿主細胞靶蛋白,通過GO、String生物信息分析細胞靶蛋白可能的生物學過程。結果成功構建誘餌質粒;cDNA文庫容量4×10⁶克隆,插入片段100～3 000 bp,且無污染,達到建庫質控要求;酵母雙雜交結果顯示,與Ats-1蛋白互作的宿主細胞靶蛋白7個,分別是真核延伸因子1復合體α1亞基（EEF1A1）、TIMP金屬蛋白酶抑制子1（TIMP1）、鋅指蛋白36,C3H樣2 （ZFP36L2）、半乳糖凝集素1（LGALS1）、前胸腺素α（PTMA）、WBSCR22、吸引素（ATRN）。生物信息分析顯示,與Ats-1互作的宿主靶蛋白主要參與細胞分化增殖、細胞凋亡、自噬、炎癥等生物學過程。結論病原誘餌蛋白與宿主細胞靶蛋白互... 

【文章來源】：石河子大學學報(自然科學版). 2020,38(02)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

目的基因ats-1的PCR擴增

Ats-1蛋白質三級結構預測

Ats-1蛋白質無形體內互作網絡圖


本文編號：3398901