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成骨誘導(dǎo)因子Nell-1及Noggin短發(fā)卡RNA聯(lián)合轉(zhuǎn)染脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的促成骨分化能力

發(fā)布時間:2021-09-06 05:13
  背景:Nell-1在誘導(dǎo)成骨分化和新骨形成中的作用已有報道,但試圖通過雙基因聯(lián)合轉(zhuǎn)染起協(xié)同成骨作用的研究很少。目的:體外環(huán)境下抑制細(xì)胞中Noggin基因的同時上調(diào)Nell-1基因,觀察其對脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化能力的影響。方法:取健康成年大鼠脂肪組織獲取脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞。將細(xì)胞分為3組,對照組轉(zhuǎn)染空載體病毒Lv-EGFP(增強(qiáng)型綠色熒光蛋白),Nell-1組單純轉(zhuǎn)染Lv-Nell-1,Nell-1+Noggin shRNA組同時轉(zhuǎn)染Lv-Nell-1和Lv-Noggin shRNA。轉(zhuǎn)染后3,7,14d,應(yīng)用實(shí)時熒光定量PCR檢測Nell-1及成骨相關(guān)標(biāo)志物(Col-Ⅰ、ALP、OCN)的表達(dá),轉(zhuǎn)染后14 d行茜素紅染色。結(jié)果與結(jié)論:①轉(zhuǎn)染后3 d,對照組Nell-1 mRNA相對表達(dá)量與Nell-1組比較,差異無顯著性意義(P> 0.05)。與Nell-1+Noggin shRNA組比較,對照組和Nell-1組Nell-1 mRNA表達(dá)量偏低,差異均有顯著性意義(P<0.05)。轉(zhuǎn)染后7,14d,Nell-1+Noggin shRNA組Nell-1m RNA相對表達(dá)量仍... 

【文章來源】:中國組織工程研究. 2020,24(31)北大核心

【文章頁數(shù)】:5 頁

【部分圖文】:

成骨誘導(dǎo)因子Nell-1及Noggin短發(fā)卡RNA聯(lián)合轉(zhuǎn)染脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的促成骨分化能力


轉(zhuǎn)染后14 d各組脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞茜素紅染色

形態(tài)圖,間充質(zhì)干細(xì)胞,茜素,脂肪


轉(zhuǎn)染后48 h各組脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞熒光顯微鏡明場(左列)及熒光(右列)下形態(tài)觀察(×200)

測序,間充質(zhì)干細(xì)胞,脂肪,轉(zhuǎn)染


圖3 轉(zhuǎn)染后48 h各組脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞熒光顯微鏡明場(左列)及熒光(右列)下形態(tài)觀察(×200)圖4 轉(zhuǎn)染后第3,7,14天各組脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞Nell-1及成骨相關(guān)基因的表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]TGF-β2 downregulates osteogenesis under inflammatory conditions in dental follicle stem cells[J]. Soyoun Um,Joo-Hee Lee,Byoung-Moo Seo.  International Journal of Oral Science. 2018(04)



本文編號:3386815

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