目的構(gòu)建含可誘導(dǎo)共刺激分子（ICOS）融合蛋白（ICOSIg）基因的真核表達(dá)載體,探討其能否在大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞（ADSCs）中表達(dá)。方法克隆編碼大鼠ICOS的胞外片段,將其與編碼人免疫球蛋白Ig G Fc段的基因融合,構(gòu)建ICOSIg融合基因及其分泌型真核表達(dá)載體pc DNA3.1（+）/ICOSIg。經(jīng)測序鑒定后轉(zhuǎn)染ADSCs,Western blot法檢測ICOSIg在ADSCs中的表達(dá)。結(jié)果經(jīng)測序鑒定驗證pc DNA3.1（+）/ICOSIg質(zhì)粒構(gòu)建成功,且能在ADSCs中成功表達(dá)。結(jié)論 ICOSIg在ADSCs中成功表達(dá),為進(jìn)一步研究免疫耐受機(jī)制提供了實驗基礎(chǔ)。 

【文章來源】：天津醫(yī)藥. 2020,48(08)北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

ADSCs誘導(dǎo)分化為成脂細(xì)胞、成骨細(xì)胞及成胰島樣細(xì)胞（×200)

pcDNA3.1（+）/ICOSIg重組質(zhì)�；驕y序圖

選擇酶切鑒定正確的重組質(zhì)粒，將其中的插入片段經(jīng)測序鑒定，與GenBank上公布的目標(biāo)序列完全一致，無插入、缺失和移碼突變，表明質(zhì)粒構(gòu)建正確，見圖2。2.3大鼠ADSCs的體外培養(yǎng)和鑒定


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