目的研究過表達dnaJ基因?qū)︴U曼不動桿菌生物膜形成的影響。方法以ATCC19606基因組DNA為模板擴增dnaJ基因并與質(zhì)粒pWH1266雙酶切后連接,篩選重組質(zhì)粒并轉(zhuǎn)化菌株ATCC19606,從而構(gòu)建dnaJ基因過表達菌株19606-p-dnaJ,類似的辦法構(gòu)建空質(zhì)粒對照組19606-p,用半定量結(jié)晶紫染色法觀察生物膜形成的差異。結(jié)果 dnaJ基因過表達組dnaJ基因相對表達量顯著高于空質(zhì)粒對照組,dnaJ基因過表達組24h生物膜量顯著低于空質(zhì)粒對照組（P<0.001）。結(jié)論過表達dnaJ基因?qū)︴U曼不動桿菌生物膜形成能力有顯著抑制作用。 

【文章來源】：中國抗生素雜志. 2020,45(05)CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

過表達dnaJ基因?qū)︴U曼不動桿菌浮游菌生長的影響

將用Eco RI酶與Bam HI酶雙酶切后的大片段產(chǎn)物，用高保真PCR酶補齊殘端，后用連接酶自連，將自連產(chǎn)物電轉(zhuǎn)(1.75kV)入感受態(tài)細胞DH5α中，用驗證引物篩選陽性克隆(圖3中A)，送測序，結(jié)果與刪除質(zhì)粒部分片段后的序列一致，提取該質(zhì)粒跑電泳(圖3中B)，條帶位置與原質(zhì)粒相近，表明是單一質(zhì)粒自連而成，表明自連質(zhì)粒構(gòu)建成功，用上述方法導(dǎo)入ATCC19606中并篩選陽性克隆，作為空質(zhì)粒對照組，記為19606-p。圖2 驗證引物PCR產(chǎn)物1%瓊脂糖電泳圖

驗證引物PCR產(chǎn)物1%瓊脂糖電泳圖

【參考文獻】：
期刊論文
[1]卡泊芬凈對糞腸球菌生物膜形成能力影響的初步研究[J]. 白冰,林志偉,徐廣健,孫翔,陳俊文,涂浩鵬,李多云,余治健,鄧啟文,鄭金鑫.  中國感染控制雜志. 2019(07)
[2]細菌核酸提取方法對熒光定量PCR檢測差異分析[J]. 聞子鈺,梁昊,顧一心,鞠長燕,馬艷萍,段永翔,張茂俊.  中國病原生物學(xué)雜志. 2019(06)
[3]鮑曼不動桿菌生物膜形成機制研究進展[J]. 馬曉春,代軍,徐磊,張仕斌,高麗麗.  中國感染與化療雜志. 2018(01)
[4]臨床分離鮑曼不動桿菌生物被膜形成能力研究[J]. 鄒自英,朱冰,熊杰,曾平,汪璐,吳艾霖,陳莉.  西南國防醫(yī)藥. 2012(09)
[5]中國鮑曼不動桿菌感染診治與防控專家共識[J]. 陳佰義,何禮賢,胡必杰,倪語星,邱海波,石巖,施毅,王輝,王明貴,楊毅,張菁,俞云松.  中國醫(yī)藥科學(xué). 2012(08)
[6]鮑曼不動桿菌臨床分離株生物被膜形成能力與耐藥性的研究[J]. 王政,劉丁,黃冬梅,陳萍,王豪,成瑤.  中國病原生物學(xué)雜志. 2010(06)



本文編號：3334285