本文關(guān)鍵詞：間充質(zhì)干細(xì)胞在玻璃化凍存人卵巢組織異種移植兔模型中的應(yīng)用探索，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景： 當(dāng)今社會(huì)中,罹患腫瘤的患者數(shù)量逐年提高且發(fā)病年齡有年輕化的趨勢(shì),各類治療手段的不斷進(jìn)步,使得患者的生存率改善,但治療的副作用迫使許多年輕女性失去生育能力,這部分人群有著恢復(fù)生育能力的強(qiáng)烈需求；此外,部分正常女性因個(gè)人原因、社會(huì)經(jīng)濟(jì)等因素主觀上要求推遲自身的生育時(shí)間但卻面臨卵巢功能隨年齡增長(zhǎng)日漸衰退的風(fēng)險(xiǎn)。因此,通過某種技術(shù)保存生育功能并在適當(dāng)?shù)臅r(shí)機(jī)進(jìn)行移植恢復(fù),包括內(nèi)分泌功能和生育功能,是有現(xiàn)實(shí)意義的。卵巢組織冷凍保存技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)在體外長(zhǎng)期保存卵巢,多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)證明其正常卵泡的保存效率可達(dá)90%以上。卵巢組織的異種移植是恢復(fù)生育能力的途徑之一,但移植早期面臨缺血缺氧,可導(dǎo)致卵泡大量丟失；移植后期,因免疫排斥問題,亦可導(dǎo)致組織的壞死。間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)作為再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域內(nèi)一種有巨大潛力的細(xì)胞,具有誘導(dǎo)分化和一定的免疫調(diào)節(jié)能力。將其應(yīng)用于卵巢組織異種移植兔模型中國(guó)內(nèi)外均未見報(bào)道。因此,研究MSCs在兔體內(nèi)的走行以及對(duì)移植卵巢組織所起的作用的探索,包括局部調(diào)節(jié)能力及組織再生能力,對(duì)于提高卵巢組織的移植效果具有重要的意義。 目的： 1、提高玻璃化凍存的效率,以期體外長(zhǎng)期保存女性生育功能。 2、研究MSCs在人卵巢組織異種移植兔模型中的走行,在移植部位中發(fā)揮的免疫調(diào)節(jié)能力及組織修復(fù)能力,提高卵巢組織的存活能力。 3、尋找MSCs的最佳給藥方式。 方法： 將新鮮的卵巢組織通過玻璃化凍存的方法進(jìn)行低溫保存,4周后進(jìn)行復(fù)蘇,于2小時(shí)內(nèi)進(jìn)行移植。選擇20只性成熟的雌性新西蘭大白兔作為人卵巢組織異種移植的受體,經(jīng)去勢(shì)手術(shù)處理后隨機(jī)分配到4組中。經(jīng)凍存-復(fù)蘇后的人卵巢組織移植到兔背肌內(nèi),按以下不同處理分成四組：1、MSC組：MSCs耳緣靜脈注射(1x106/kg)+等量生理鹽水肌注；2、FTY組：MSCs培養(yǎng)基耳緣靜脈注射+FTY720肌注(2mg/kg/d);3、MFIV組：MSCs耳緣靜脈注射(1x106/kg)+FTY720肌注(2mg/kg/d);4、MFIM組：MSCs肌注(1x106/kg)+FTY720肌注(2mg/kg/d).所有MSCs均于注射前用CM-Dil染料進(jìn)行處理。移植前3天起除MSC組外,其余三組每天使用FTY720(2mg/kg)進(jìn)行免疫抑制。所有移植物于移植后8周全部回收。移植物移植前用HE染色及電鏡評(píng)估組織的形態(tài)完整性；采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)兔外周血E2水平及IFN-γ水平；取新鮮抗凝全血檢測(cè)兔外周血中CD4及CD8淋巴細(xì)胞的比例；8周后記錄卵巢組織回收率及觀察肉眼形態(tài)；回收后移植物HE染色觀察組織形態(tài)及纖維化壞死率；取移植部位及其他全身實(shí)質(zhì)器官用激光共聚焦觀察MSCs的走行情況。 結(jié)果： 1、使用卵巢組織玻璃化凍存的方法能較好的保存卵巢組織,包括卵泡、粒細(xì)胞及基質(zhì)； 2、不同給藥方式給與的間充質(zhì)干細(xì)胞均可以在體內(nèi)游走,8周后不同部位定植細(xì)胞的數(shù)量為移植部位脾臟肺等其他實(shí)質(zhì)器官； 3、FTY720聯(lián)合MSCs可以更好地減輕免疫排斥反應(yīng),維持卵巢組織分泌雌二醇,且降低基質(zhì)的纖維化和壞死率； 4、經(jīng)靜脈注射的MSCs其移植部位定植的細(xì)胞量多于局部注射組,免疫排斥反應(yīng)亦低于局部注射組。 結(jié)論： 1、間充質(zhì)干細(xì)胞和FTY720聯(lián)合應(yīng)用存在一定的協(xié)同作用,可以促進(jìn)組織的存活,降低免疫排斥反應(yīng)。 2、間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)靜脈給藥可更加有效的提高卵巢組織存活率,保存卵巢功能。
【關(guān)鍵詞】：卵巢組織 異種移植 間充質(zhì)干細(xì)胞 兔
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R713.6;R-332
【目錄】：

• 致謝4-6
• 中文摘要6-9
• Abstract9-12
• 中英文縮略詞12-13
• 目錄13-14
• 1. 引言14-18
• 2. 實(shí)驗(yàn)材料與方法18-28
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-39
• 4. 討論39-42
• 5. 結(jié)論42-43
• 參考文獻(xiàn)43-46
• 綜述46-59
• 參考文獻(xiàn)53-59
• 作者簡(jiǎn)歷及在學(xué)期間所取得的科研成果59

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 劉德伍;李曉亮;張志安;;血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子聯(lián)合堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子體外誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為血管內(nèi)皮樣細(xì)胞[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2008年47期

2 付小兵,方利君,王玉新,孫同柱,程飚;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞自體移植提高豬皮膚創(chuàng)面修復(fù)質(zhì)量的初步研究[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2004年11期

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本文編號(hào)：333422