發(fā)布時間：2021-07-21 10:22

　　目的觀察不同濃度尿酸對人骨髓間充質(zhì)干細胞（hBMSCs）成骨分化過程中核心結(jié)合因子α1（Cbfα1/Runx2）表達變化的影響。方法以體外培養(yǎng)的健康成年hBMSCs為研究對象,分為5個組,分別為對照組（完全培養(yǎng)基組）和加入不同濃度尿酸（0 mmol/l、0.2 mmol/l、0.4 mmol/l、0.8mmol/l）的成骨誘導組,通過倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài),堿性磷酸酶染色和茜素紅染色鑒定細胞。在干預誘導第7天和第14天行RT-PCR檢測Cbfα1/Runx2的表達。結(jié)果堿性磷酸酶染色和茜素紅染色結(jié)果均陽性,表示誘導后細胞為成骨細胞。RT-PCR結(jié)果表明,對照組各時間點均無Cbfα1/Runx2表達,尿酸培養(yǎng)組隨尿酸濃度增加和時間的延長,Cbfα1/Runx2表達逐漸增強,呈現(xiàn)時間依賴性和濃度依賴性。結(jié)論尿酸可能通過促進Cbfα1/Runx2的表達,從而促進hBMSCs向成骨細胞分化。 

【文章來源】：中國骨質(zhì)疏松雜志. 2013,19(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

空白對照組hBMSCs(×100)

圖1a空白對照組hBMSCs(×100)Fig．1ahBMSCsinblankcontrolgroup(×100)圖1b0.8mmol/L尿酸誘導第5d(×100)Fig．1bThe5thdayof0.8mmol/luricacidinduction(×100)2.3Cbfα1/Runx2mRNA表達結(jié)果RT-PCR檢測示，對照組無Cbfα1/Runx2基因表達。成骨誘導阻隨尿酸濃度增加和時間延長，Cbfα1/Runx2基因的表達逐步增強，其中0.8mmol/L組最明顯，且相同濃度下，基因表達第14d強于第7d，各組間差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見圖3和圖4。3討論BMSCs是組織工程研究中的種子細胞之一，正常情況下，處于未分化的平衡狀態(tài)，且保留了向多種前體細胞分化的能力［6］。在一定條件下BMSCs可圖1c0.8mmol/L尿酸誘導第8d(×100)Fig．1cThe8thdayof0.8mmol/luricacidinduction(×100)圖2aALP染色(×100)Fig．2aALPstaining(×100)向成骨細胞、脂肪細胞、軟骨細胞、神經(jīng)細胞等分化。Nuttall等［7］研究發(fā)現(xiàn)BMSCs的成骨與成脂分化之間存在相互關(guān)系，骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生與BMSCs成骨分化能力減弱，同時伴有成脂分化能力增強有關(guān)，因此提出可以通過抑制BMSCs的脂肪分化，達到預防和治療骨質(zhì)疏松癥的目的。骨質(zhì)疏松癥(Osteoporosis，OP)嚴重影響中老年人的生活質(zhì)量，是世界范圍的公共健康問題。有研究表明代謝綜合征(MS)是OP的獨立風險因素［8-9］，且多集中于研究體重［10］、血糖、血脂等對骨量的影響［11］，很少有尿酸與骨量關(guān)系的研究。尿酸作為嘌呤代謝的終產(chǎn)物，大量研究發(fā)現(xiàn)尿酸是多種疾病的危險因素，如心血管疾�。�12］、高血壓�。�12］、中國骨質(zhì)疏松雜志2013年4月第19卷第4期ChinJOsteoporos，April2013，Vol19，No．4365

圖1a空白對照組hBMSCs(×100)Fig．1ahBMSCsinblankcontrolgroup(×100)圖1b0.8mmol/L尿酸誘導第5d(×100)Fig．1bThe5thdayof0.8mmol/luricacidinduction(×100)2.3Cbfα1/Runx2mRNA表達結(jié)果RT-PCR檢測示，對照組無Cbfα1/Runx2基因表達。成骨誘導阻隨尿酸濃度增加和時間延長，Cbfα1/Runx2基因的表達逐步增強，其中0.8mmol/L組最明顯，且相同濃度下，基因表達第14d強于第7d，各組間差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見圖3和圖4。3討論BMSCs是組織工程研究中的種子細胞之一，正常情況下，處于未分化的平衡狀態(tài)，且保留了向多種前體細胞分化的能力［6］。在一定條件下BMSCs可圖1c0.8mmol/L尿酸誘導第8d(×100)Fig．1cThe8thdayof0.8mmol/luricacidinduction(×100)圖2aALP染色(×100)Fig．2aALPstaining(×100)向成骨細胞、脂肪細胞、軟骨細胞、神經(jīng)細胞等分化。Nuttall等［7］研究發(fā)現(xiàn)BMSCs的成骨與成脂分化之間存在相互關(guān)系，骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生與BMSCs成骨分化能力減弱，同時伴有成脂分化能力增強有關(guān)，因此提出可以通過抑制BMSCs的脂肪分化，達到預防和治療骨質(zhì)疏松癥的目的。骨質(zhì)疏松癥(Osteoporosis，OP)嚴重影響中老年人的生活質(zhì)量，是世界范圍的公共健康問題。有研究表明代謝綜合征(MS)是OP的獨立風險因素［8-9］，且多集中于研究體重［10］、血糖、血脂等對骨量的影響［11］，很少有尿酸與骨量關(guān)系的研究。尿酸作為嘌呤代謝的終產(chǎn)物，大量研究發(fā)現(xiàn)尿酸是多種疾病的危險因素，如心血管疾�。�12］、高血壓�。�12］、中國骨質(zhì)疏松雜志2013年4月第19卷第4期ChinJOsteoporos，April2013，Vol19，No．4365

【參考文獻】：
期刊論文
[1]不同濃度尿酸對人骨髓間充質(zhì)干細胞增殖的影響[J]. 楊乃龍,朱曉琳,張冬.  中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2012(17)
[2]尿酸對人胎盤間充質(zhì)干細胞增殖的影響[J]. 崔晶,楊乃龍,王靜怡.  中國組織工程研究. 2012(10)
[3]代謝綜合征對骨量的影響[J]. 張劼,羅佐杰,梁敏,陳卓宏,黃仲奎.  中國骨質(zhì)疏松雜志. 2009(08)
[4]老年男性代謝綜合征患者骨密度與骨量、骨代謝物的關(guān)系[J]. 羅南萍,劉恒國,李金花,胡成進.  中國組織工程研究與臨床康復. 2008(07)



本文編號：3294840