目的建立穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的小鼠黑色素瘤細(xì)胞系（B16R）,并構(gòu)建適用于小動(dòng)物活體成像觀察的C57小鼠皮下移植瘤模型。方法利用脂質(zhì)體將攜帶熒光素酶基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到小鼠黑色素瘤細(xì)胞株B16R中,用嘌呤霉素篩選出表達(dá)熒光素酶的單克隆細(xì)胞株B16R-Firefly luciferase（B16R-FLUC）,再用化學(xué)發(fā)光檢測(cè)B16R-FLUC熒光素酶基因的表達(dá),擴(kuò)增培養(yǎng)后,接種于C57小鼠,建立C57小鼠皮下移植瘤模型,通過活體動(dòng)物成像系統(tǒng)檢測(cè)B16R-FLUC的成瘤性。結(jié)果化學(xué)發(fā)光方法檢測(cè)出B16R-FLUC細(xì)胞中熒光素酶基因,動(dòng)物活體成像系統(tǒng)檢測(cè)出C57皮下移植瘤中熒光信號(hào),B16R-FLUC有很好的成瘤特性。結(jié)論成功構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的B16R細(xì)胞系,為客觀性評(píng)價(jià)抗黑色素瘤新藥的治療效果提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 

【文章來源】：湖北科技學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2020,34(03)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

B16R-FLUC細(xì)胞熒光素酶基因的檢測(cè)

B16R-FLUC細(xì)胞體內(nèi)成瘤性的檢測(cè)

由于B16R-FLUC細(xì)胞株中含有綠色熒光蛋白,故在熒光顯微鏡可觀察到綠色熒光,如圖1(封三)。嘌呤霉素篩選及單克隆篩選的細(xì)胞株生長狀態(tài)良好,無污染,陽性細(xì)胞率高,待檢測(cè)過表達(dá)Firefly luciferase后,可以大量擴(kuò)增細(xì)胞,凍存細(xì)胞株,方便后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。2.2 B16R-FLUC細(xì)胞熒光素酶基因的檢測(cè)


本文編號(hào)：3285228