目的建立穩(wěn)定表達熒光素酶的小鼠黑色素瘤細胞系（B16R）,并構(gòu)建適用于小動物活體成像觀察的C57小鼠皮下移植瘤模型。方法利用脂質(zhì)體將攜帶熒光素酶基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到小鼠黑色素瘤細胞株B16R中,用嘌呤霉素篩選出表達熒光素酶的單克隆細胞株B16R-Firefly luciferase（B16R-FLUC）,再用化學發(fā)光檢測B16R-FLUC熒光素酶基因的表達,擴增培養(yǎng)后,接種于C57小鼠,建立C57小鼠皮下移植瘤模型,通過活體動物成像系統(tǒng)檢測B16R-FLUC的成瘤性。結(jié)果化學發(fā)光方法檢測出B16R-FLUC細胞中熒光素酶基因,動物活體成像系統(tǒng)檢測出C57皮下移植瘤中熒光信號,B16R-FLUC有很好的成瘤特性。結(jié)論成功構(gòu)建穩(wěn)定表達熒光素酶的B16R細胞系,為客觀性評價抗黑色素瘤新藥的治療效果提供了實驗基礎(chǔ)。 

【文章來源】：湖北科技學院學報(醫(yī)學版). 2020,34(03)

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【部分圖文】：

B16R-FLUC細胞熒光素酶基因的檢測

B16R-FLUC細胞體內(nèi)成瘤性的檢測

由于B16R-FLUC細胞株中含有綠色熒光蛋白,故在熒光顯微鏡可觀察到綠色熒光,如圖1(封三)。嘌呤霉素篩選及單克隆篩選的細胞株生長狀態(tài)良好,無污染,陽性細胞率高,待檢測過表達Firefly luciferase后,可以大量擴增細胞,凍存細胞株,方便后續(xù)實驗使用。2.2 B16R-FLUC細胞熒光素酶基因的檢測


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