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基于骨再生應(yīng)用的間充質(zhì)干細(xì)胞比較及成骨分化相關(guān)IncRNAs篩選

發(fā)布時(shí)間:2021-07-07 13:52
  骨是一種獨(dú)特的具有自我修復(fù)和再生能力的器官,出生后的骨骼保留了其固有的在機(jī)械刺激下能夠生長(zhǎng)、改建以及在損傷后能夠再生的能力。然而,如果出現(xiàn)嚴(yán)重創(chuàng)傷或全身性疾病、病理性骨折、骨和/或周圍組織的感染或血液供應(yīng)受損,骨組織可能會(huì)失去這種充分自愈的能力,這可能會(huì)導(dǎo)致永久性的骨缺損從而喪失相關(guān)部位的功能。此外,這種再生能力也會(huì)隨著年齡的增長(zhǎng)而下降,反映出來(lái)就是骨質(zhì)疏松癥,過(guò)去一個(gè)世紀(jì)醫(yī)學(xué)的進(jìn)步使得人們的平均壽命不斷增長(zhǎng),與此同時(shí),罹患骨質(zhì)疏松的人數(shù)也相應(yīng)的越來(lái)越多。而在口腔頜面部,先天畸形、創(chuàng)傷、腫瘤、炎癥等所致的頜骨缺損不僅造成顏面畸形,還可能引起語(yǔ)言、咀嚼、呼吸等口腔功能的障礙,給患者在生理、心理方面都會(huì)帶來(lái)許多不良影響。因此,對(duì)患者肌肉骨骼疾病的治療一直受到臨床醫(yī)師的高度重視,而對(duì)新治療方法的追尋也是臨床研究者們一直的努力方向。組織工程學(xué)是一門從20世紀(jì)末期興起的新興學(xué)科,它是集生物工程、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、材料學(xué)等于一體的交叉學(xué)科,為骨缺損的功能性修復(fù)與重建提出了一種新的思路,而隨著組織工程與再生醫(yī)學(xué)這一更大范疇理念的深入人心,通過(guò)體內(nèi)或體外進(jìn)行再生性治療來(lái)恢復(fù)患者缺失的組織結(jié)構(gòu)和功... 

【文章來(lái)源】:山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:183 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

基于骨再生應(yīng)用的間充質(zhì)干細(xì)胞比較及成骨分化相關(guān)IncRNAs篩選


圖1-2?7種MSCs的多向分化能力(A)通過(guò)茜素紅染色評(píng)估成骨分化

生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué),對(duì)數(shù)期,口腔,分析顯示


然后進(jìn)入隨后的對(duì)數(shù)期。四種口腔來(lái)源的MSCs和UCMSCs具有相似的增殖速??率(/>>0.05),并且分別從第5天和第3天開始細(xì)胞數(shù)顯著多于BM-MSCs和ADSCs??(p<0.〇5)(圖1-3A)。EdU標(biāo)記分析顯示了類似的結(jié)果。在DPSCs,PDLSCs,??GMSCs,DFSCs和UCMSCs中觀察到比在BM-MSCs和ADSCs中更高比例的??EdU陽(yáng)性細(xì)胞(圖1-3B、C),表明這五種MSCs具有更強(qiáng)的增殖能力。??A?B??EdlJ??I?locchst?Merge??im?>i、,、????di'sc?????丨:3^?-■■■??3…:、二卜1...人:;乂」「.?'?'?M?f?二(..??‘.、、'??、?、?、?、??"”、_.、、?、??ADST、?X???:4???,:&?*??:&???:?&?丨'??c?HHH?liHH?HHIHl??11?勹?hm-msl?sM?i|?|?|?jp?1?j??1:]||||士圔:圔??^?IIBHIHH^HbHI'??圖1-3不同MSCs增殖能力的比較(A)?CCK-8分析MSCs的生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)。(B)?EdU??染色顯示處于DNA復(fù)制期的細(xì)胞。紅色,EdU陽(yáng)性細(xì)胞核。藍(lán)色,所有細(xì)胞核。??紫色

細(xì)胞,表達(dá)水平,前中期,相關(guān)蛋白


的Caspase-9和BAX表達(dá)較少,GMSCs和UCMSCs的Caspase-9表達(dá)水平較高,??DFSCs中,盡管Caspase-9表達(dá)水平較低,但BAX?/?Bcl-2比率較高,并且抑凋??亡蛋白C-IAP2和survivin的表達(dá)水平在各種細(xì)胞中均為最低(圖1-5)。??,ZVcvcv’VcV??丨mm??w?:丨??!觶浚犽s???c-iap,??c-iap2??sur'mn?It?麵曝■?? ̄???——?1_??Caspasc-9??GAPDH??圖1-5促調(diào)亡與抗調(diào)亡蛋白的Western?blot分析??1.2.4細(xì)胞成骨分化能力的比較??為了研究源自不同組織的MSCs的成骨能力,我們?cè)诔晒钦T導(dǎo)14天時(shí)檢測(cè)??了細(xì)胞的ALP活性,28天時(shí)檢測(cè)了礦化結(jié)節(jié)的形成,并在14天時(shí)檢測(cè)了成骨??分化前中期相關(guān)蛋白C0L1和ALP的表達(dá),28天時(shí)檢測(cè)了成骨分化晚期標(biāo)志蛋??白OCN的表達(dá)情況。ALP染色在PDLSCs,DFSCs,?BM-MSCs和ADSCs中更??深,其次是DPSCs,而GMSCs和UCMSCs在第14天染色較少(圖1-6?A)。通??過(guò)ALP活性檢測(cè)觀察到相似的趨勢(shì)

【參考文獻(xiàn)】:
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本文編號(hào):3269750

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