神經(jīng)干細(xì)胞（neural stem cells,NSCs）具備自我更新的本領(lǐng)及分化為神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞與少突膠質(zhì)細(xì)胞的潛能。在胚胎腦發(fā)育過程中,NSCs可以通過產(chǎn)生不同類型的神經(jīng)細(xì)胞保證神經(jīng)連接和腦功能的完整性和精確性。胚胎期NSCs發(fā)育異常是造成眾多新生患兒神經(jīng)管畸形、小頭畸形等出生缺陷的直接因素。目前,NSCs發(fā)育異常導(dǎo)致的先天缺陷是人類面臨的最為嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)之一,給家庭和社會(huì)帶來了沉重負(fù)擔(dān)。除此之外,NSCs在特定條件和因子誘導(dǎo)下可以定向分化成不同類型神經(jīng)細(xì)胞,這為神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病和神經(jīng)損傷等提供了新的治療策略。因此對(duì)NSCs增殖、分化調(diào)控機(jī)制的研究是揭示臨床上常見中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育缺陷疾病致病機(jī)制的關(guān)鍵,同時(shí)也為一些神經(jīng)障礙疾病的治療提供新思路。本實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期致力于胚胎發(fā)育缺陷疾病模型的建立和致病機(jī)理的研究。前期工作中篩選到含HMG-box結(jié)構(gòu)域的蛋白TOX3,屬于TOX（thymocyte selection-associated HMG-box）家族成員。TOX3 在腦內(nèi)高表達(dá),但現(xiàn)在在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中的作用研究還較少。另外,p53誘導(dǎo)的內(nèi)源性糖酵解抑制因子TIGAR（TP53... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：150 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１?ＴＯＸ３在胚胎發(fā)育時(shí)期大腦皮層的表達(dá)情況

為了系統(tǒng)地分析Ｔ０Ｘ３在祌經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中的功能及作用，我們構(gòu)建了?ＴＯＸ３??基因敲除小鼠，通過將Ｔ０Ｘ３的４號(hào)外顯子剪接到ｌａｃＺ誘捕元件而破壞Ｔ０Ｘ３??基因的表達(dá)（圖２Ａ）。提取新生鼠鼠尾ＤＮＡ進(jìn)行基因型鑒定，并對(duì)Ｔ０Ｘ３的敲??除效率進(jìn)行檢測(cè)。通過Ｔ０Ｘ３?Ｃ末端特異性抗體的Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ分析顯示純合敲??除小鼠中ＴＯＸ３蛋白顯著下降（圖２Ｂ）。ｑＰＣＲ結(jié)果顯示ＴＯＸ３ｍＲＮＡ也是下降??的（圖２Ｃ）。與同窩野生型鼠對(duì)比，Ｔ０Ｘ３全身敲除小鼠的敲除效率能達(dá)到？８０％，??純合敲除小鼠中檢測(cè)到的蛋白可能是由可變剪接引起的亞等位基因效應(yīng)產(chǎn)生的。??３９??

通過對(duì)Ｔ０Ｘ３基因敲除小鼠進(jìn)行表型觀察，發(fā)現(xiàn)ＴＯＸ３雜合子小鼠能夠存活??并且具有正常體型和生育能力，而純合敲除小鼠在出生后一天至一周內(nèi)死亡。出??生后第１天，敲除鼠的體型變小，體重和腦重減輕，腦外觀變�。▓D３Ａ－Ｃ）。其??它器官如心臟、肝、肺等未見異常。??Ｂ．?Ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｗｅｉｇｈｔｓ?ａｔ?Ｐ１?Ｃ．丨抓??Ｂｒａｉｎ?＾ｌ］??Ｗｈｏｌｅ?ａｎｉｍａｌ?｜Ｌ?＇９＾?ＪｌＨ??圖３?Ｔ０Ｘ３基因敲除小鼠體重和腦重減輕。（Ａ）?ＰＩ天ＴＯＸ３敲除小鼠和ＷＴ小??鼠體型差異。（Ｂ）?Ｐ１天Ｔ０Ｘ３敲除小鼠和ＷＴ小鼠體重和腦重分析。（Ｃ）?Ｐ１??天ＴＯＸ３敲除小鼠和ＷＴ小鼠腦外觀大小。ｎ＝３。??３．?ＴＯＸ３基因敲除導(dǎo)致大腦皮層變薄??通過石蠟切片技術(shù)對(duì)Ｐ１天新生鼠進(jìn)行冠狀腦切片，ＨＥ染色結(jié)果顯示與同??４０??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Lysine Acetylation and Deacetylation in Brain Development and Neuropathies[J]. Alicia Tapias,Zhao-Qi Wang.  Genomics,Proteomics & Bioinformatics. 2017(01)



本文編號(hào)：3268611