研究背景:生殖支原體（Mycoplasma genitalium,Mg）是由Tully等于1981年分離到的一種支原體。它是一類缺乏細(xì)胞壁但能夠自我復(fù)制的最小原核細(xì)胞型微生物。Mg經(jīng)由其膜蛋白結(jié)合在宿主細(xì)胞膜上,是介導(dǎo)Mg致病的基礎(chǔ)。生殖支原體黏附蛋白（M.genitalium protein of adhesion,MgPa）是含量最多的膜蛋白,Mg可能經(jīng)MgPa黏附或侵入宿主細(xì)胞從而引起致病。本課題組前期研究表明人尿道上皮細(xì)胞（SV-HUC-1）膜上的親環(huán)蛋白（Cyclophilin A,CypA）是MgPa的受體蛋白,MgPa與其受體特異結(jié)合能介導(dǎo)Mg侵入宿主細(xì)胞,但其具體的致病機(jī)制尚未闡明。本課題旨在研究MgPa與宿主細(xì)胞膜上的CypA相互作用后對宿主細(xì)胞的影響,并揭示其可能的信號通路,從而為Mg的防治提供新的思路和靶點。研究目的:研究MgPa誘導(dǎo)SV-HUC-1分泌的胞外CypA（eCypA）與CD147相互作用,進(jìn)而經(jīng)ERK1/2-NF-κB通路誘導(dǎo)細(xì)胞分泌促炎癥因子,以闡釋Mg可能的致病機(jī)制。研究方法:（1）免疫印跡實驗（Western blot,WB）和間接酶聯(lián)免疫吸附... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

ELISA檢測不同濃度MgPa誘導(dǎo)細(xì)胞分泌的eCypAFig.1TheeCypAsecretedbySV-HUC-1cellstreatedwithdifferentconcentrationofMgPaweredetectedusingELISA.Note:Thenote*indicatesp<0.05comparedwiththeNgroup,**indicatesp<0.01comparedwiththeNgroup,***

圖 2 ELISA 檢測 MgPa 處理 SV-HUC-1 細(xì)胞不同時間后 eCypA 的表達(dá)he expressions of eCypA in SV-HUC-1 cells treated with MgPa for different time were d..te: The note * indicates p<0.05 compared with the N group, ** indicates p<0.01 compared wgroup,icates p<0.001 compared with the N group WB 檢測處理細(xì)胞不同時間后 CypA 和 CD147 的表達(dá)用 20μg/mL 的 MgPa 分別刺激 SV-HUC-1 細(xì)胞 0h、8h、16h、2 48h，提取細(xì)胞蛋白用 Western blot 法檢測細(xì)胞刺激不同時間其47 的表達(dá)情況，結(jié)果如圖 3 所示，隨著 MgPa 刺激時間的增加，47 的表達(dá)逐漸增多，且當(dāng) MgPa 刺激細(xì)胞 32h 時，CypA 和 CD14高。

圖 3 WB 檢測 MgPa 處理 SV-HUC-1 細(xì)胞不同時間后 CypA 和 CD147Fig. 3 The expression of CypAand CD147 in SV-HUC-1 cells treated with Mgwere measured by Western blot. Values are provided as fold increases control.4.4間接免疫熒光法檢測處理不同時間后CypA和C4.4.1 間接免疫熒光法檢測處理細(xì)胞不同時間后 CypA20μg/mL 的 MgPa 分別處理 SV-HUC-1 細(xì)胞 0h、12h用間接免疫熒光法檢測 CypA 的表達(dá)情況，結(jié)果如圖 4 所間的增加，CypA 的表達(dá)逐漸增加。


本文編號：3255416