目的探討胎盤間充質干細胞培養(yǎng)液中血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）對體外培養(yǎng)卵巢早衰模型大鼠卵巢抗凋亡因子B淋巴細胞瘤-2基因（BCL-2）表達的影響。方法收集胎盤間充質干細胞單獨培養(yǎng)1、3、4及6 d的培養(yǎng)液,與卵巢早衰模型大鼠卵巢組織共培養(yǎng)4 d,分別用Real-time PCR、組織免疫組化和Western blot檢測其旁分泌VEGF對卵巢早衰模型大鼠卵巢BCL-2表達的影響。結果胎盤間充質干細胞培養(yǎng)不同時間（6、12、24、36、48、60、72 h）的上清液中VEGF分泌水平用ELISA檢測結果顯示,培養(yǎng)6與12 h分泌水平相比,差異無統(tǒng)計學意義;隨著培養(yǎng)時間延長,VEGF分泌水平逐漸增加,與培養(yǎng)24 h相比,差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;培養(yǎng)60 h以后可能達到分泌的平臺期;共培養(yǎng)前后2組免疫組化Bcl-2蛋白表達檢測顯示大鼠卵巢皮質片顆粒細胞均可見棕褐色陽性染色,共培養(yǎng)前卵巢顆粒細胞凋亡細胞分布范圍廣,有時密集成堆;共培養(yǎng)后凋亡細胞分布數(shù)目較少,散在分布。Real-time PCR檢測結果顯示,與卵巢共培養(yǎng)4 d BCL-2基因表達水平升高,差異有統(tǒng)計學意義（P&l... 

【文章來源】：寧夏醫(yī)學雜志. 2020,42(08)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 資料與方法
    1.1 一般資料:
    1.2 方法
        1.2.1 卵巢早衰大鼠模型建立及半卵巢體外培養(yǎng):
        1.2.2 模型大鼠半卵巢與胎盤間充質干細胞共培養(yǎng):
        1.2.3 Real-time PCR檢測BCL-2和Bax mRNA的表達:
        1.2.4 ELISA 檢測胎盤干細胞培養(yǎng)上清液VEGF分泌水平:
        1.2.5 培養(yǎng)后卵巢免疫組化檢測Bcl-2的表達:
        1.2.6 Western blot檢測半卵巢蛋白表達:
    1.3 統(tǒng)計學方法:
2 結果
    2.1 胎盤間充質干細胞分離培養(yǎng)及表面分子標記CD90鑒定:
    2.2 胎盤間充質干細胞培養(yǎng)液VEGF分泌檢測:
    2.3 共培養(yǎng)前后卵巢的BCL-2基因表達Real-time PCR檢測:
    2.4 共培養(yǎng)前后卵巢的免疫組化BCL-2蛋白表達檢測:
    2.5 共培養(yǎng)前后卵巢的Western blot檢測:
3 討論


【參考文獻】：
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本文編號：3239426