位于大腦半球底部白質(zhì)中的基底神經(jīng)節(jié),在機(jī)體運(yùn)動(dòng)功能調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。丘腦底核（subthalamic nucleus,STN）作為基底神經(jīng)節(jié)中唯一的興奮性核團(tuán),是基底神經(jīng)節(jié)的重要信息整合核團(tuán),基底神經(jīng)節(jié)任一環(huán)路出現(xiàn)異常均會(huì)導(dǎo)致帕金森�。≒arkinson’s disease）等運(yùn)動(dòng)障礙性疾病。下丘腦分泌的一類生物活性肽-食欲素（orexin）,參與運(yùn)動(dòng)調(diào)控等多種生物學(xué)效應(yīng)。有文獻(xiàn)報(bào)道orexin能夠增加正常大鼠丘腦底核神經(jīng)元的自發(fā)放電并調(diào)控軀體搖擺行為。丘腦底核有豐富的orexin-2受體（orexin-2 receptor,OX-2R）表達(dá)。目的:探討丘腦底核orexin-B對(duì)1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine（MPTP）帕金森病模型小鼠運(yùn)動(dòng)行為的調(diào)控,并在單細(xì)胞水平研究其可能的機(jī)制。方法:采用曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)和爬桿實(shí)驗(yàn)觀察丘腦底核orexin-B對(duì)MPTP帕金森病模型小鼠運(yùn)動(dòng)行為的影響。進(jìn)一步利用在體細(xì)胞外電生理記錄觀察orexin-B對(duì)丘腦底核神經(jīng)元自發(fā)放電的調(diào)控。最后通過免疫組織化學(xué)技術(shù)觀察OX-2R在正常和MPTP帕金森病模型小... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

細(xì)胞外記錄用三管玻璃微電極Fig.1Schemeof3-barrelglassmicroelectrodeusinginextracellularrecording

圖 2 丘腦底核細(xì)胞外電生理記錄定位冠狀切片圖Fig. 2 Confirmation of the site of extracellular electrophysiological recordingSTN: subthalamic nucleus.組織化學(xué)染色常小鼠與成模兩天左右的帕金森病模型小鼠灌注取腦，放置多聚甲醛而后依次經(jīng) 20%、30%的蔗糖溶液脫水，若腦組織未完全沉淀至溶液新蔗糖溶液中重新脫水。冰凍切片機(jī)將腦組織行 20μm 切片，在 24 孔 的 PBS 反復(fù)沖洗腦片（5min×3 次）。每孔滴加 3%內(nèi)源性過氧化物酶室溫下孵育 5~10min，之后用 PBS 沖洗 3 次至無泡沫。每孔滴加 1體或 1:250 的 OX-2R 抗體，周圍孔滴入適量 PBS 防止水分蒸發(fā)，密封夜。24~36h 后用 PBS 反復(fù)沖洗 3 次，每孔滴加 200μL 山羊抗兔二抗育 60~90min 后行 DAB 顯色（5~10min），貼片→晾干→酒精梯/80%/95%/100%）→二甲苯透明處理→封片。學(xué)分析

圖 3 雙側(cè)丘腦底核微量注射 orexin-B 對(duì)正常小鼠曠場(chǎng)運(yùn)動(dòng)總距離的影響cts of bilateral-subthalamic-injection of orexin-B on total distance travelfield test of normal miceshowing that the total distance traveled in orexin-B mice was significaith normal saline mice.**P<0.01 compared with normal saline grouns: not significant.鼠運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)的改變驗(yàn)中，取 23 只小鼠進(jìn)行運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)能力的測(cè)試，生理鹽水組 5 只CS-OX2-29 組 6 只和聯(lián)合給藥 Orexin-B+TCS-OX2-29 組 6 只示，生理鹽水組小鼠轉(zhuǎn)頭時(shí)間為（1.14±0.13）s，Orexin-B 組7±0.16）s，兩組比較差異顯著（t=2.40，P=0.050）。TCS-OX為（1.05±0.09）s，與生理鹽水組相比，無顯著性差異（TCS-OX2-29 組小鼠轉(zhuǎn)頭時(shí)間為（1.23±0.10）s，與 Orexin-B （P=0.105）。生理鹽水組小鼠爬桿時(shí)間為（2.54±0.20）s，


本文編號(hào)：3231963