目的研究靶向肝臟過表達(dá)細(xì)胞因子IL-15對機(jī)體免疫系統(tǒng)的影響。方法構(gòu)建IL-15重組表達(dá)質(zhì)粒pLIVE-IL-15,采用高壓注射的方式尾靜脈注射C57BL/6小鼠,ELISA檢測小鼠血清中IL-15的表達(dá)水平,流式檢測小鼠脾臟和肝臟淋巴細(xì)胞亞群變化。結(jié)果成功構(gòu)建pLIVE-IL-15質(zhì)粒,pLIVE-IL-15質(zhì)粒高壓注射小鼠后血清中能檢測到IL-15持續(xù)表達(dá)。與pLIVE-EGFP對照組相比,pLIVE-IL-15質(zhì)粒注射鼠天然免疫系統(tǒng)NK細(xì)胞和NKT細(xì)胞以及獲得性免疫系統(tǒng)的CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞數(shù)目均顯著增加（P<0.05）。體內(nèi)過表達(dá)IL-15促進(jìn)NK細(xì)胞高表達(dá)CD69和IFN-γ,而NKT細(xì)胞活化狀態(tài)改變不明顯,IL-15能顯著誘導(dǎo)CD8+T細(xì)胞高分泌IFN-γ（P<0.05）,而對CD4+T細(xì)胞IFN-γ分泌影響較小。結(jié)論 pLIVE-IL-15靶向肝臟后能在體內(nèi)持續(xù)表達(dá),并且能調(diào)節(jié)天然免疫系統(tǒng)和獲得性免疫系統(tǒng)反應(yīng)。 

【文章來源】：第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2013,35(16)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

PCR方法檢測IL-15基因

黽櫻?飪贍苡隢KT細(xì)胞本底活化水平較高有關(guān)。2．4pLIVE-IL-15質(zhì)粒持續(xù)表達(dá)對獲得性免疫系統(tǒng)的影響我們發(fā)現(xiàn)IL-15質(zhì)粒高壓注射后，小鼠脾臟和肝臟中CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞數(shù)目均有顯著增長(P＜0.05，圖5A、B)。CD4+T細(xì)胞IFN-γ的表達(dá)在IL-15刺激后只是略有增加(圖5C、D)，CD8+T細(xì)胞分泌IFN-γ的能力要明顯高于pLIVE-EGFP對照組(P＜0.05，圖5E、F)。700600500400300200100001234血清IL鄄15濃度（pg/mL）pLIVE鄄EGFPpLIVE鄄IL鄄15注射后時(shí)間（t/周）圖2ELISA檢測質(zhì)粒高壓注射后小鼠血清中IL-15含量104103102101100100101102103104FL2鄄HFL3鄄H104103102101100100101102103104FL2鄄HFL3鄄H104103102101100100101102103104FL2鄄HFL3鄄H104103102101100100101102103104FL2鄄HFL3鄄HCD3脾臟NK肝臟NKNK1.1pLIVE鄄EGFPpLIVE鄄IL鄄154.7%12.14%9.0%47.66%104103102101100100101102103104NK1.1IFN鄄γ104103102101100100101102103104104103102101100100101102103104IFN鄄γ104103102101100100101102103104IFN鄄γ脾臟NK肝臟NKCD3-NK1.1+pLIVE鄄EGFPpLIVE鄄IL鄄158.17%9.75%4.93%NK1.1IFN鄄γNK1.1IFN鄄γNK

K肝臟NKCD69pLIVE鄄EGFPpLIVE鄄IL鄄1530.23%0FL1鄄H60015100101102103104FL1鄄H細(xì)胞數(shù)目044.28%100101102103104FL1鄄H22906050403020100NK細(xì)胞數(shù)目（105）脾臟肝臟pLIVE鄄EGFPpLIVE鄄IL鄄15aaACBD細(xì)胞數(shù)目細(xì)胞數(shù)目細(xì)胞數(shù)目11.02%58.98%6.79%A:NK1．1+CD3-NK細(xì)胞比例;B:NK細(xì)胞數(shù)對比分析a:P＜0．05，與pLIVE-EGFP質(zhì)粒比較;C:CD69表達(dá);D:NK細(xì)胞IFN-γ表達(dá)圖3流式細(xì)胞儀檢測IL-15對小鼠脾臟和肝臟NK細(xì)胞數(shù)目和活化狀態(tài)的影響1694第35卷第16期2013年8月30日第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)JThirdMilMedUnivVol．35，No．16Aug．302013


本文編號：3230074