目的建立可快速檢測(cè)狂犬病病毒（rabies virus,RabV）糖蛋白抗原含量的雙抗體夾心ELISA方法,并進(jìn)行驗(yàn)證及初步應(yīng)用。方法用抗RabV糖蛋白基因工程抗體建立雙抗體夾心ELISA法,檢測(cè)RabV糖蛋白抗原含量。對(duì)建立的方法進(jìn)行特異性、線性、準(zhǔn)確性、板內(nèi)與板間精密性、靈敏度驗(yàn)證,對(duì)不同廠家（毒株分別為aG、PV、CTN、PM）生產(chǎn)的狂犬病疫苗與不同工藝階段的狂犬病疫苗樣品進(jìn)行適用性檢測(cè)。結(jié)果捕獲抗體與酶標(biāo)抗體最佳稀釋度分別為1∶2 000和1∶4 000,最佳封閉劑為1. 5%BSA。該方法與其他人用疫苗和輔料成分無交叉反應(yīng);線性范圍在0. 003 2～0. 103 1 IU/mL之間,R2> 0. 98;準(zhǔn)確性驗(yàn)證的回收率在97. 0%～110. 1%之間;精密性驗(yàn)證的板內(nèi)變異系數(shù)<8. 6%,板間變異系數(shù)<13. 9%;檢測(cè)不同廠家的狂犬病疫苗和不同工藝階段的疫苗樣品呈良好的劑量依賴效應(yīng)。結(jié)論建立了適用于人用狂犬病疫苗糖蛋白抗原含量檢測(cè)的雙抗體夾心ELISA方法,符合定量檢測(cè)的需求,可用于aG、PV、CTN、PM等不同毒株生產(chǎn)的狂犬病疫苗檢測(cè);也可用于病毒... 

【文章來源】：中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2020,33(04)CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

線性回歸驗(yàn)證

回歸方程為y=1.219 8 x+2.460 5,R2=0.986 9�？乖♂尡稊�(shù)的對(duì)數(shù)與A450值的對(duì)數(shù)呈良好的線性關(guān)系，線性范圍在0.001 6～0.206 3 IU/mL之間，見圖2。圖2 線性回歸驗(yàn)證

建立的方法檢測(cè)不同生產(chǎn)毒株狂犬病疫苗糖蛋白抗原含量的曲線趨勢(shì)基本一致，A450值與疫苗稀釋度呈良好的劑量依賴效應(yīng)，見圖3。2.3.2 不同疫苗工藝階段樣品的檢測(cè)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人用狂犬病疫苗中糖蛋白抗原檢測(cè)方法的建立及適用性研究[J]. 曹守春,張全福,王云鵬,劉洋,李阿茜,李川,孫麗娜,梁米芳.  中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志. 2016 (06)



本文編號(hào)：3227920