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腐食酪螨的形態(tài)和分子特征鑒定

發(fā)布時間:2021-04-17 15:44
  目的通過形態(tài)和分子特征鑒定腐食酪螨。方法從儲存時間超過1年的面粉樣品中分離摘蟲,飼養(yǎng)后取卵、幼螨、若螨、成螨,分別在光鏡和掃描電鏡下觀察其外部形態(tài)和超微形態(tài)并鑒定。提取螨蟲DNA,PCR擴(kuò)增細(xì)胞色素氧化酶亞基Ⅰ(cox1)和內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS),將PCR產(chǎn)物分別連接載體pMD19-T,轉(zhuǎn)化至大腸埃希菌,通過藍(lán)白斑篩選后,取陽性克隆進(jìn)行雙向測序。序列測定后,采用DNAMAN軟件拼接,所得序列用DNAStar軟件分析堿基組成,同時與GenBank上已知的粉螨亞目粉螨進(jìn)行BLAST比對分析,并構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹。結(jié)果光鏡下可見螨體呈橢圓形,表皮光滑無色,半透明,螯肢和足略帶棕色,軀體上的剛毛細(xì)長而不硬直。電鏡下螨蟲各發(fā)育階段的足、剛毛和外生殖器及其附屬結(jié)構(gòu)的形態(tài)均清晰可辨。幼螨足3對,若螨和成螨足4對,璧肢1對,由3節(jié)構(gòu)成,第IV基節(jié)之間可見扇形的生殖區(qū),支持陽莖的側(cè)骨片向外彎曲形成"人"字形,肛門細(xì)長,位于后半體,體末端肛后毛較長。第一背毛(d1)短,第二背毛(d2)較長,肩內(nèi)毛(hi)比肩外毛(he)長,末端見明顯的肛后毛(pa)超出軀體很多。前足體可見頂內(nèi)毛(vi)和頂外毛(ve),胛內(nèi)... 

【文章來源】:中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2020,38(01)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:7 頁

【部分圖文】:

腐食酪螨的形態(tài)和分子特征鑒定


腐食酪螨各發(fā)育階段電鏡下觀察

電泳圖,階段,電泳圖,基因


腐食酪螨cox1基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳圖

光鏡,階段,剛毛,螯肢


成螨無色,表皮光滑,足4對。背面第一背毛很短(d1),第二背毛(d2)長度為d1的3倍左右,肩內(nèi)毛(hi)比肩外毛(he)長,且與身體成直角。體末端可見明顯的肛后毛(pa)超出軀體很多(圖2E、2F)。螯肢的兩側(cè)呈扁平狀,后面的部分較大。前足體可見頂內(nèi)毛(vi)延申且超出螯肢頂端,頂外毛(ve)在vi的稍后位置,比足的膝節(jié)長。胛內(nèi)毛(sci)比胛外毛(sce)長,基節(jié)上毛(ps)扁平側(cè)突(圖2G)。足Ⅰ、足Ⅱ短而粗,足節(jié)Ⅰ長度不超過膝、脛節(jié)之和,足節(jié)Ⅰ上的感棒ω在頂端較膨大,膝節(jié)上的膝外毛(o1)較膝內(nèi)毛(o2)稍長。足Ⅱ長約跗節(jié)和脛節(jié)與足Ⅰ相似,膝節(jié)前端無膝外毛與膝內(nèi)毛,只有一根剛毛(圖2H)。足Ⅲ、足Ⅳ相較于足Ⅰ、足Ⅱ細(xì)而長,足上有細(xì)而直的剛毛,剛毛無分叉(圖2I)。雄螨生殖孔外表有1對生殖瓣及2對生殖盤,中間為陽莖,支持陽莖的側(cè)骨片向外彎曲,陽莖較短。肛門達(dá)軀體末端,周圍著有肛毛5對,肛后毛3對(p2、p1、p3)(圖2J、2K),雌螨無肛吸盤(圖2L)。經(jīng)形態(tài)鑒定確認(rèn)腐食酪螨。2.3 腐食酪螨cox1基因擴(kuò)增結(jié)果與系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]超高倍多媒體顯微診斷儀在腐食酪螨成螨形態(tài)鑒定中的應(yīng)用[J]. 楊李,馬桂芳,李啟松,崔玉寶,史進(jìn)方.  中國病原生物學(xué)雜志. 2018(02)
[2]華支睪吸蟲成蟲體被結(jié)構(gòu)掃描電鏡和透射電鏡觀察[J]. 石云良,萬孝玲,蔣智華,成曉靜,楊益超.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2018(02)
[3]腐食酪螨過敏原研究進(jìn)展[J]. 易忠權(quán),楊李,夏偉,趙盼雯,崔玉寶.  中國病原生物學(xué)雜志. 2017(09)
[4]基于mtDNA COI基因的甘肅截形葉螨不同地理種群遺傳分化分析[J]. 楊順義,周興隆,宋麗雯,嚴(yán)曉彤,張小云,張新虎,沈慧敏.  昆蟲學(xué)報. 2017(09)
[5]我國塵螨分布的Meta分析[J]. 俞黎黎,張承伯,滕飛翔,卞勇華,孫金霞,楊李,王楠,崔玉寶.  中國病原生物學(xué)雜志. 2017(05)
[6]腐食酪螨致皮炎1例[J]. 洪勇,柴強(qiáng),陶寧,李朝品.  中國血吸蟲病防治雜志. 2017(03)
[7]腐食酪螨成螨形態(tài)觀察[J]. 郭偉,姜玉新.  生物學(xué)雜志. 2014(03)
[8]幾種鈍綏螨ITS基因片段的序列分析[J]. 鄒志文,陳芬,夏斌,吳瑜,張宇.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(23)
[9]5種蚌螨ITS2基因片段序列及其系統(tǒng)發(fā)育分析[J]. 吳浩彬,程劍,文春根,謝彥海,郭維.  南昌大學(xué)學(xué)報(理科版). 2011(02)
[10]一種適用于昆蟲痕量DNA模板制備的方法[J]. 溫碩洋,何曉芳.  昆蟲知識. 2003(03)

碩士論文
[1]基于線粒體COI序列的中國東南地區(qū)馬六甲肉食螨的系統(tǒng)地理結(jié)構(gòu)研究[D]. 楊小強(qiáng).南昌大學(xué) 2013



本文編號:3143714

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