目的通過形態(tài)和分子特征鑒定腐食酪螨。方法從儲存時間超過1年的面粉樣品中分離摘蟲,飼養(yǎng)后取卵、幼螨、若螨、成螨,分別在光鏡和掃描電鏡下觀察其外部形態(tài)和超微形態(tài)并鑒定。提取螨蟲DNA,PCR擴增細胞色素氧化酶亞基Ⅰ（cox1）和內轉錄間隔區(qū)（ITS）,將PCR產物分別連接載體pMD19-T,轉化至大腸埃希菌,通過藍白斑篩選后,取陽性克隆進行雙向測序。序列測定后,采用DNAMAN軟件拼接,所得序列用DNAStar軟件分析堿基組成,同時與GenBank上已知的粉螨亞目粉螨進行BLAST比對分析,并構建系統(tǒng)進化樹。結果光鏡下可見螨體呈橢圓形,表皮光滑無色,半透明,螯肢和足略帶棕色,軀體上的剛毛細長而不硬直。電鏡下螨蟲各發(fā)育階段的足、剛毛和外生殖器及其附屬結構的形態(tài)均清晰可辨。幼螨足3對,若螨和成螨足4對,璧肢1對,由3節(jié)構成,第IV基節(jié)之間可見扇形的生殖區(qū),支持陽莖的側骨片向外彎曲形成"人"字形,肛門細長,位于后半體,體末端肛后毛較長。第一背毛（d1）短,第二背毛（d2）較長,肩內毛（hi）比肩外毛（he）長,末端見明顯的肛后毛（pa）超出軀體很多。前足體可見頂內毛（vi）和頂外毛（ve）,胛內... 

【文章來源】：中國寄生蟲學與寄生蟲病雜志. 2020,38(01)北大核心CSCD

【文章頁數】：7 頁

【部分圖文】：

腐食酪螨各發(fā)育階段電鏡下觀察

腐食酪螨cox1基因PCR擴增產物電泳圖

成螨無色，表皮光滑，足4對。背面第一背毛很短（d1），第二背毛（d2）長度為d1的3倍左右，肩內毛（hi）比肩外毛（he）長，且與身體成直角。體末端可見明顯的肛后毛（pa）超出軀體很多（圖2E、2F）。螯肢的兩側呈扁平狀，后面的部分較大。前足體可見頂內毛（vi）延申且超出螯肢頂端，頂外毛（ve）在vi的稍后位置，比足的膝節(jié)長。胛內毛（sci）比胛外毛（sce）長，基節(jié)上毛（ps）扁平側突（圖2G）。足Ⅰ、足Ⅱ短而粗，足節(jié)Ⅰ長度不超過膝、脛節(jié)之和，足節(jié)Ⅰ上的感棒ω在頂端較膨大，膝節(jié)上的膝外毛(o1）較膝內毛（o2）稍長。足Ⅱ長約跗節(jié)和脛節(jié)與足Ⅰ相似，膝節(jié)前端無膝外毛與膝內毛，只有一根剛毛（圖2H）。足Ⅲ、足Ⅳ相較于足Ⅰ、足Ⅱ細而長，足上有細而直的剛毛，剛毛無分叉（圖2I）。雄螨生殖孔外表有1對生殖瓣及2對生殖盤，中間為陽莖，支持陽莖的側骨片向外彎曲，陽莖較短。肛門達軀體末端，周圍著有肛毛5對，肛后毛3對（p2、p1、p3）（圖2J、2K），雌螨無肛吸盤（圖2L）。經形態(tài)鑒定確認腐食酪螨。2.3 腐食酪螨cox1基因擴增結果與系統(tǒng)發(fā)育樹的構建

【參考文獻】：
期刊論文
[1]超高倍多媒體顯微診斷儀在腐食酪螨成螨形態(tài)鑒定中的應用[J]. 楊李,馬桂芳,李啟松,崔玉寶,史進方.  中國病原生物學雜志. 2018(02)
[2]華支睪吸蟲成蟲體被結構掃描電鏡和透射電鏡觀察[J]. 石云良,萬孝玲,蔣智華,成曉靜,楊益超.  中國寄生蟲學與寄生蟲病雜志. 2018(02)
[3]腐食酪螨過敏原研究進展[J]. 易忠權,楊李,夏偉,趙盼雯,崔玉寶.  中國病原生物學雜志. 2017(09)
[4]基于mtDNA COI基因的甘肅截形葉螨不同地理種群遺傳分化分析[J]. 楊順義,周興隆,宋麗雯,嚴曉彤,張小云,張新虎,沈慧敏.  昆蟲學報. 2017(09)
[5]我國塵螨分布的Meta分析[J]. 俞黎黎,張承伯,滕飛翔,卞勇華,孫金霞,楊李,王楠,崔玉寶.  中國病原生物學雜志. 2017(05)
[6]腐食酪螨致皮炎1例[J]. 洪勇,柴強,陶寧,李朝品.  中國血吸蟲病防治雜志. 2017(03)
[7]腐食酪螨成螨形態(tài)觀察[J]. 郭偉,姜玉新.  生物學雜志. 2014(03)
[8]幾種鈍綏螨ITS基因片段的序列分析[J]. 鄒志文,陳芬,夏斌,吳瑜,張宇.  中國農業(yè)科學. 2011(23)
[9]5種蚌螨ITS2基因片段序列及其系統(tǒng)發(fā)育分析[J]. 吳浩彬,程劍,文春根,謝彥海,郭維.  南昌大學學報(理科版). 2011(02)
[10]一種適用于昆蟲痕量DNA模板制備的方法[J]. 溫碩洋,何曉芳.  昆蟲知識. 2003(03)

碩士論文
[1]基于線粒體COI序列的中國東南地區(qū)馬六甲肉食螨的系統(tǒng)地理結構研究[D]. 楊小強.南昌大學 2013



本文編號：3143714