目的探究神經(jīng)生長(zhǎng)因子（nerve growth factor,NGF）過表達(dá)對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷模型認(rèn)知功能的影響。方法將SD大鼠分成空白對(duì)照組、模型組和NGF轉(zhuǎn)染組。水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組大鼠學(xué)習(xí)能力,熒光定量PCR,Western blot和免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)NGF和Caspase-3的相對(duì)表達(dá)水平,免疫熒光染色定位NGF蛋白的表達(dá),尼氏染色和透射電鏡觀察神經(jīng)元細(xì)胞的數(shù)量以及血腦屏障的完整性。結(jié)果 NGF轉(zhuǎn)染組逃避潛伏期時(shí)間要明顯短于模型組,而穿越平臺(tái)次數(shù)明顯多于模型組。NGF轉(zhuǎn)染組NGF蛋白和mRNA相對(duì)表達(dá)量明顯高于模型組,Caspase-3蛋白和mRNA相對(duì)表達(dá)量明顯低于模型組。NGF蛋白與神經(jīng)元細(xì)胞標(biāo)記蛋白NSE可共染,而與神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物GFAP不可共染。NGF轉(zhuǎn)染組細(xì)胞數(shù)明顯多于模型組細(xì)胞數(shù)。模型組細(xì)胞輪廓模糊,血腦屏障破壞,而NGF轉(zhuǎn)染組細(xì)胞輪廓存在,血腦屏障破壞較小。結(jié)論 NGF的過表達(dá)促進(jìn)神經(jīng)元細(xì)胞的存活,對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷模型的認(rèn)知功能有保護(hù)作用。 

【文章來源】：解剖科學(xué)進(jìn)展. 2020,26(04)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 NGF過表達(dá)載體構(gòu)建
    1.3 缺血再灌注損傷SD大鼠模型的構(gòu)建與實(shí)驗(yàn)分組
    1.4 水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組大鼠學(xué)習(xí)能力
    1.5 熒光定量PCR檢測(cè)NGF和Caspase-3的mRNA相對(duì)表達(dá)水平
    1.6 Western blot檢測(cè)NGF和Caspase-3的表達(dá)水平
    1.7 尼氏染色
    1.8 免疫熒光染色
    1.9 免疫組織化學(xué)染色
    1.1 0 透射電鏡觀察
    1.1 1 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 大鼠的學(xué)習(xí)能力檢測(cè)結(jié)果
    2.2 RT-PCR檢測(cè)NGF和凋亡相關(guān)因子Caspase-3的m RNA的相對(duì)表達(dá)量
    2.3 Western blot檢測(cè)NGF和凋亡相關(guān)因子Caspase-3的蛋白表達(dá)量
    2.4 尼氏染色
    2.5 免疫熒光染色結(jié)果定位NGF蛋白的表達(dá)
    2.6 免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)NGF蛋白和Caspase-3的表達(dá)
    2.7 透射電鏡染色結(jié)果
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]慢病毒介導(dǎo)NGF過表達(dá)轉(zhuǎn)染促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)化的研究[J]. 鄧明,謝萍,馬永剛,明江華,周炎,陳慶,劉志勇,劉世清.  中國(guó)臨床研究. 2019(02)
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[3]轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β激活激酶1介導(dǎo)的細(xì)胞自噬在小鼠腦缺血-再灌注損傷中的作用[J]. 謝凡,樊友凌,楊明明,聶穎,周俊.  臨床麻醉學(xué)雜志. 2017(02)
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