目的運用PCR-RFLP技術(shù)對中緬邊境地區(qū)惡性瘧原蟲進(jìn)行MSP-2多態(tài)性分析,鑒定其等位基因類型。方法對采自云南省中緬邊境地區(qū)的勐臘、騰沖和盈江,及緬甸的那威、南卡江、芒東和拉咱7個縣（市）鏡檢為單一感染惡性瘧的全血或濾紙血樣,采用基于18SrRNA基因巢式PCR進(jìn)行瘧原蟲種類鑒定,并對鑒定為惡性瘧或混合感染血樣進(jìn)行PCR-RFLP檢測。結(jié)果鏡檢為惡性瘧的256份血樣,經(jīng)18SrRNA基因巢式PCR鑒定為惡性瘧226份,間日瘧14份,混合感染16份。PCR-RFLP檢測惡性瘧血樣共215份,204份含有MSP-2等位基因,占94.9%。其中41份屬于單一FC27家族,占20.1%;30份屬于單一3D7家族,占14.7%;133份屬于FC27和3D7家族混合感染,占65.2%。其余11份未檢出MSP-2等位基因。FC27、3D7和FC27+3D7等位基因在9～29歲患者或2 500～100 000個瘧原蟲/μl血中檢出率較高,分別為58.6%（102/174）、57.7%（94/163）、55.64%（74/133）和59.2%（103/174）、58.3%（95/163）、60.15%... 

【文章來源】：中國病原生物學(xué)雜志. 2020,15(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

惡性瘧患者血樣采集點示意圖

非洲和東南亞瘧疾流行區(qū)惡性瘧原蟲株MSP-2多態(tài)性研究結(jié)果顯示，惡性瘧MSP-2基因的中間變異區(qū)經(jīng)HinfⅠ限制性內(nèi)切酶酶切后在FC27家族中產(chǎn)生115bp和137bp兩條特異的酶切片段，且部分等位基因酶切后除上述兩條酶切片段外還能產(chǎn)生1條162bp以及不同拷貝數(shù)的96bp酶切片段；3D7家族中只能產(chǎn)生70bp和108bp兩條特異的酶切片段[8-10]。因此HinfⅠ酶切分析是RFLP分型技術(shù)中的第一步，基本能夠鑒定樣品中所含的MSP-2等位基因類型，而對一些酶切片段復(fù)雜的樣品可再進(jìn)行AluⅠ和ScrFⅠ等限制性內(nèi)切酶酶切分析[11]，從而提高M(jìn)SP-2等位基因分型的準(zhǔn)確性。為確保分型的準(zhǔn)確性，本研究對所有樣品均做HinfⅠ、AluⅠ、ScrFⅠ、DdeⅠ、RsaⅠ和TaqⅠ限制性內(nèi)切酶酶切與分析。2.5 統(tǒng)計學(xué)分析

MSP-2的FC27和3D7等位基因在19～29歲患者中的分布分別占32.76%(57/174）和31.29%(51/163），在9～19歲患者分別占25.68%(45/174）和26.38%(43/163);FC27+3D7等位基因在19～29和9～19歲患者分別占33.08%(44/133）和25.56%(34/133）。各基因型在各采樣點和患者年齡段中的分布如圖4和圖5所示。MSP-2的FC27和3D7等位基因分布按照患者年齡分組，其等位基因分布頻率在中國和緬甸兩個大采樣點之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=10.774,P>0.05）和（χ2=9.427,P>0.05）。圖4 中緬邊境地區(qū)惡性瘧原蟲MSP-2的FC27基因型年齡分布

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3121923