長散在核重復(fù)序列1 （long interspersed nuclear element-1, LINE-1）是迄今為止發(fā)現(xiàn)的人體基因組中唯一具有自主轉(zhuǎn)座活性的逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子,其轉(zhuǎn)座常引起宿主基因組不穩(wěn)定,從而導(dǎo)致包括癌癥在內(nèi)的各種嚴(yán)重基因疾病的發(fā)生。宿主因子在宿主抗LINE-1轉(zhuǎn)座中發(fā)揮著重要作用。宿主因子SLFN14作為免疫系統(tǒng)重要組成員,具有抗病毒活性。本實(shí)驗(yàn)室研究發(fā)現(xiàn)SLFN14對(duì)于LINE-1的轉(zhuǎn)座具有抑制作用。為進(jìn)一步探究其具體的作用機(jī)制,通過對(duì)LINE-1復(fù)制周期中的轉(zhuǎn)錄、翻譯、逆轉(zhuǎn)錄、整合環(huán)節(jié)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分析,證實(shí)SLFN14能夠通過影響LINE-1 mRNA轉(zhuǎn)錄過程及其半衰期,降低LINE-1 mRNA的水平,從而影響LINE-1蛋白及cDNA表達(dá)水平,最終導(dǎo)致LINE-1復(fù)制受阻。同時(shí),通過對(duì)SLFN14活性中心的定位,本研究還發(fā)現(xiàn)SLFN14的抗LINE-1活性與其核糖核酸內(nèi)切酶結(jié)構(gòu)域和核糖體結(jié)合結(jié)構(gòu)域密切相關(guān)。上述研究結(jié)果展示了SLFN14調(diào)控LINE-1復(fù)制的機(jī)制,進(jìn)一步完善了宿主因子調(diào)控網(wǎng)絡(luò),為控制因LINE-1復(fù)制引起的基因組不穩(wěn)定提供了新思路。 

【文章來源】：遺傳. 2020,42(07)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：11 頁

【部分圖文】：

SLFN14抑制LINE-1逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座

上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，SLFN14 dN3不抑制LINE-1 ORF1p表達(dá)。基于此，在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中以SLFN14 dN3為陰性對(duì)照進(jìn)行SLFN14抗LINE-1活性的機(jī)制研究。2.3 SLFN14并非通過影響ORF2p逆轉(zhuǎn)錄酶活性影響LINE-1 cDNA水平

將LINE-1和不同濃度的SLFN14質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞，然后Real-time PCR測(cè)定總LINE-1RNA，結(jié)果顯示，隨著SLFN14的增加，LINE-1 RNA明顯下降且呈劑量依賴性(圖4A),SLFN14 dN3則與對(duì)照組相比無顯著差異(圖4B)，這表明SLFN14影響了LINE-1 RNA水平。圖4 SLFN14能夠降低LINE-1 RNA水平

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]DNMT3a通過提升基因內(nèi)部甲基化介導(dǎo)紫杉醇誘導(dǎo)的LINE-1異常表達(dá)[J]. 王昕源,張雨,楊楠,程禾,孫玉潔.  遺傳. 2020(01)
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[3]逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子LINE-1與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展[J]. 劉茜,王瑾暉,李曉宇,岑山.  遺傳. 2016(02)
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本文編號(hào)：3114629