第一部分hnRNPU蛋白在睪丸中的表達與定位研究【目的】研究hnRNPU蛋白在物種之間的保守性,并探討其在人和小鼠睪丸中的表達水平以及細胞定位模式�！痉椒ā坷蒙镄畔W分析、免疫熒光、免疫組化、RT-q PCR、Western blot等方法對hnRNPU的氨基酸序列在人、獼猴、牛、狗、大鼠、小鼠等物種中的保守性進行分析,并研究hnRNPU在人和小鼠睪丸中的表達及定位�！窘Y果】hnRNPU蛋白氨基酸序列在人和小鼠中的保守性高達97.25%,hnRNPU蛋白在人和小鼠睪丸中高度表達,且主要在睪丸生殖細胞和支持細胞的細胞核中表達�！窘Y論】hnRNPU在哺乳動物中高度保守,且定位在睪丸生殖細胞和支持細胞的細胞核中。第二部分生殖細胞中hnRNPU對小鼠精子發(fā)生和生育能力影響的研究【目的】研究生殖細胞中的hnRNPU對小鼠精子發(fā)生和生育能力調控的作用�！痉椒ā坷肅re-Loxp系統(tǒng)構建生殖細胞條件性敲除Hnrnpu基因的小鼠模型,通過生育率測試、睪丸形態(tài)學分析等方法以解析hnRNPU在精子發(fā)生和雄性生育力中的作用及功能�！窘Y果】成功構建了Stra8-Cre介導的生殖細胞條件性敲除hnRNPU... 

【文章來源】：華中科技大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

hnRNPU蛋白進化保守性分析和在小鼠不同組織中的表達圖

圖 2：hnRNPU 在小鼠生殖細胞和支持細胞中的表達及定位圖。圖 2A：免疫組織化學分析 hnRNPU 蛋白在小鼠睪丸中的表達定位。棕色代表 hnRNPU蛋白的表達，Sc 代表支持細胞，Spc 代表精母細胞，標尺=100μm。圖 2B：生殖細胞的標志物 DDX4（綠色）和 hnRNPU（紅色）在成年野生型小鼠睪丸中的雙重標記熒光實驗結果，標尺=100μm。圖 2C：支持細胞的標志物 WT1（紅色）和 hnRNPU（綠色）在成年野生型小鼠睪丸

華 中 科 技 大 學 碩 士 學 位 論 文3.3 hnRNPU 蛋白在人睪丸的生精細胞和支持細胞中同樣表達鑒于 hnRNPU 蛋白在進化中高度保守性，并且在人和小鼠中的同源性高達 97.25（圖 1A 和 B）。為更加明確 hnRNPU 蛋白對人的睪丸同樣具有重要作用，我們在的睪丸組織中對 hnRNPU 蛋白做了進一步表達驗證分析。我們收集了因“前列腺癌睪丸切除患者的睪丸組織進行了 Western Blot 實驗，實驗結果顯示 hnRNPU 蛋白在的睪丸中同樣表達（圖 3A）。另外，我們利用免疫熒光共染技術（利用生殖細胞記物 DDX4、支持細胞標記物 WT1 分別與 hnRNPU 進行共染）對 hnRNPU 蛋白在胎兒期睪丸（24 周）中進行了定位分析，結果顯示 hnRNPU 蛋白同樣定位在人睪生殖細胞和支持細胞的細胞核中（圖 3B 和 C）。這部分結果提示 hnRNP U 蛋白在睪丸中的表達定位模式與在小鼠睪丸中相類似，進一步表明該蛋白可能會參與調控類精子發(fā)生。


本文編號：3106891