幽門螺旋桿菌（Helicobacter pylori）是1983年首次從慢性活動性胃炎患者的胃黏膜中分離成功,是目前所知能夠在人胃中生存的唯一微生物種類。據(jù)不完全統(tǒng)計,全球有近50%的人口感染或攜帶幽門螺旋桿菌。通常情況下采用抗生素和質(zhì)子泵抑制劑治療,也取得了相對不錯的效果,但抗生素的耐藥性、治療費(fèi)用昂貴、治愈后再復(fù)發(fā)等因素成為影響治療不可忽視的因素,治療性疫苗的研究已經(jīng)成為攻克幽門螺旋桿菌感染的必然趨勢。本實驗從消化性胃潰瘍患者的胃組織中分離得到幽門螺旋桿菌并進(jìn)行特異性鑒定后,對幽門螺旋桿菌增殖培養(yǎng)基組分進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化研究,提高幽門螺旋桿菌產(chǎn)量的同時便于后續(xù)研究。提取幽門螺旋桿菌基因組DNA并特異性擴(kuò)增黏附素基因（Helicobacter pylori adhesin A,hpaA）和細(xì)胞毒素相關(guān)基因A（Cytotoxin-associated gen A,cagA）,應(yīng)用無縫克隆技術(shù)構(gòu)建原核表達(dá)載體PNZ8149-hpaA-cagA,電擊轉(zhuǎn)化乳酸球菌NZ3900（Lactococcus lactis,L.lactis）,構(gòu)建以乳酸球菌為疫苗載體的原核表達(dá)系統(tǒng)NZ3900/PNZ81... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

幽門螺旋桿菌ureB基因PCR結(jié)果

M：DL2000 DNA Marker；1-6：ureB 基因 PCR 結(jié)果M：DL2000 DNA Marker；1-6：PCR results of ureB gene圖2.2 脲酶顯色試驗結(jié)果Fig.2.2 Urease chromogenic test resultsA：陰性對照；B和C：培養(yǎng)所得菌落脲酶顯色結(jié)果A：Negative control of Urease chromogenic test; B and C：Urease chromogenic testresults obtained by culture

（p＜0.001），除 AC 和 BC 之外的其他交互項的 P 值均大于 0.05，這提示它們的交互作用對幽門螺旋桿菌生長條件的篩選與優(yōu)化不構(gòu)成顯著影響。模型的 F 值（53.54）表明該模型有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.01），R-Squared（0.9817）和 Adj R-Square（0.9633）的數(shù)值表明該模型的擬合度較好，響應(yīng)值的變化有超過 95％的可能性來源于所選變量。綜合以上，該模型可以較好的描述各因素與響應(yīng)值之間的真實關(guān)系，可以利用該模型的回歸方程對本實驗幽門螺旋桿菌在布氏血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)基成分的優(yōu)化與篩選情況進(jìn)行準(zhǔn)確分析與合理預(yù)測。為直觀體現(xiàn)獨(dú)立變量之間的交互作用及各獨(dú)立變量與響應(yīng)值之間的影響，響應(yīng)面結(jié)果的 3D 圖如圖 2.4 所示。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3104114