背景:流式細(xì)胞術(shù)作為目前先進(jìn)的細(xì)胞分析技術(shù),其研究基礎(chǔ)是單細(xì)胞懸液,但目前尚無(wú)有關(guān)膈肌組織單細(xì)胞懸液制備方法的相關(guān)報(bào)道。目的:探索應(yīng)用機(jī)械法與機(jī)械-酶消化法分別制備大鼠膈肌單細(xì)胞懸液的可行性并比較2種方法獲得單細(xì)胞的數(shù)量和活性。方法:以SD大鼠的新鮮膈肌組織為標(biāo)本,在機(jī)械法的基礎(chǔ)上,選用胰蛋白酶、膠原酶Ⅰ、膠原酶Ⅱ、膠原酶Ⅳ及其不同組合進(jìn)行消化制備膈肌單細(xì)胞懸液,觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)并經(jīng)錐蟲(chóng)藍(lán)染色后測(cè)定細(xì)胞活性,對(duì)活細(xì)胞、失活細(xì)胞和細(xì)胞團(tuán)塊進(jìn)行計(jì)數(shù)并計(jì)算出細(xì)胞存活率和單細(xì)胞懸液濃度,結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較分析。結(jié)果與結(jié)論:（1）機(jī)械-酶消化法所制得的單細(xì)胞懸液較機(jī)械研磨法細(xì)胞分散度好、形態(tài)完整、邊界清楚、雜質(zhì)及細(xì)胞碎片較少、背景較干凈;（2）單純機(jī)械研磨法制備的單細(xì)胞懸液活細(xì)胞數(shù)較低,失活細(xì)胞數(shù)較高,細(xì)胞存活率最低,團(tuán)塊較多;（3）在機(jī)械法的基礎(chǔ)上,加入胰蛋白酶、膠原酶Ⅰ和膠原酶Ⅳ3種等體積混合酶所得單細(xì)胞懸液的活細(xì)胞數(shù)及懸液濃度最高,每0.1g膈肌組織可獲得（1.0-2.0）×106個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞存活率較高,與單純機(jī)械法獲得單細(xì)胞懸液比較,在活細(xì)胞、失活細(xì)胞、細(xì)胞團(tuán)塊、細(xì)胞存活率及懸液濃度方面差異... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)組織工程研究. 2020,24(08)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【部分圖文】：

大鼠膈肌組織細(xì)胞形態(tài)(×100)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3101455