背景:流式細胞術作為目前先進的細胞分析技術,其研究基礎是單細胞懸液,但目前尚無有關膈肌組織單細胞懸液制備方法的相關報道。目的:探索應用機械法與機械-酶消化法分別制備大鼠膈肌單細胞懸液的可行性并比較2種方法獲得單細胞的數(shù)量和活性。方法:以SD大鼠的新鮮膈肌組織為標本,在機械法的基礎上,選用胰蛋白酶、膠原酶Ⅰ、膠原酶Ⅱ、膠原酶Ⅳ及其不同組合進行消化制備膈肌單細胞懸液,觀察細胞形態(tài)并經(jīng)錐蟲藍染色后測定細胞活性,對活細胞、失活細胞和細胞團塊進行計數(shù)并計算出細胞存活率和單細胞懸液濃度,結果進行統(tǒng)計學比較分析。結果與結論:（1）機械-酶消化法所制得的單細胞懸液較機械研磨法細胞分散度好、形態(tài)完整、邊界清楚、雜質(zhì)及細胞碎片較少、背景較干凈;（2）單純機械研磨法制備的單細胞懸液活細胞數(shù)較低,失活細胞數(shù)較高,細胞存活率最低,團塊較多;（3）在機械法的基礎上,加入胰蛋白酶、膠原酶Ⅰ和膠原酶Ⅳ3種等體積混合酶所得單細胞懸液的活細胞數(shù)及懸液濃度最高,每0.1g膈肌組織可獲得（1.0-2.0）×106個細胞,細胞存活率較高,與單純機械法獲得單細胞懸液比較,在活細胞、失活細胞、細胞團塊、細胞存活率及懸液濃度方面差異... 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2020,24(08)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

大鼠膈肌組織細胞形態(tài)(×100)

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3101455