目的通過線拴法制備SD雄性大鼠中動脈栓塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）的腦缺血再灌注模型,體外培養(yǎng)缺氧缺糖及復氧（oxygen and glucose deprivation/reperfusion,OGD/R）BV-2細胞/原代星形膠質細胞模型,觀察葉酸缺乏（folic acid deficiency,FD）對大鼠腦缺血再灌注模型和體外氧糖剝奪/復氧細胞模型中小膠質細胞/星形膠質細胞活化及其炎癥因子表達的影響,通過相關抑制劑及葉酸缺乏共同干預探討腦缺血再灌注后小膠質細胞及星形膠質細胞活化的機制,為防治與葉酸缺乏相關的腦缺血性疾病提供新的治療方法及實驗依據(jù)。方法第一部分:30只體重在120-150 g的雄性SD大鼠隨機分為假手術組（SHAM）、大腦中動脈缺血再灌注組（MCAO）、葉酸缺乏+大腦中動脈缺血再灌注組（MCAO+FD）,每組10只。正常飼料/葉酸缺乏飼料喂養(yǎng)28天后進行MCAO手術;造模后腦組織制成石蠟切片,蘇木精-伊紅染色法（hematoxylin-eosin,HE,n=4）和Fluoro-jade B法（FJ-B,n=4）檢... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

HE染色檢測葉酸缺乏對大腦梗死后海馬區(qū)神經細胞病理改變影響

染色檢測葉酸缺乏對大腦梗死后海馬區(qū)神經細胞變性的影響。A：左、G 區(qū)、CA1 區(qū)和 CA3 區(qū) FJ-B 單標記及其放大圖（FJ-B 為綠色，DAPG 區(qū)、CA1 區(qū)和 CA3 區(qū) FJ-B 陽性細胞數(shù)/DAPI 細胞數(shù)均值及標準差柱較，b：與 MCAO 組比較，*表示 MCAO+FD 組 DG 區(qū)、CA1 區(qū)和 C.05（n=4，scale bar=50 μm）缺乏對 I/R 大鼠患側海馬小膠質細胞激活的影響織切片經免疫熒光單標記法檢測結果如圖 3 所示。SHAM 組在 CA3 區(qū)的 Iba-1 陽性細胞數(shù)目很少，甚至一些視野中未見陽M 組的大鼠大腦海馬區(qū)活化的小膠質細胞很少；MCAO 手術膠質細胞明顯被激活，葉酸缺乏后小膠質細胞進一步被激活，與差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。對于 MCAO+FD 組的三個亞區(qū)得出 CA1 區(qū)相對于 DG 區(qū)和 CA3 區(qū)陽性細胞率顯著升高，差P<0.05），而 DG 區(qū)和 CA3 區(qū)差異尚不能認為有統(tǒng)計學差異（大鼠海馬組織蛋白的 Western blot 檢測進一步證實，與 SHAM

激活 MCAO 后大鼠海馬區(qū)的小膠質細胞。A：左、中、右分別 區(qū) Iba-1 免疫熒光單標記及其放大圖（Iba-1 為紅色，DAPI 1 區(qū)和 CA3 區(qū) Iba-1 免疫熒光陽性細胞數(shù)/DAPI 細胞數(shù)均值及ot 檢測葉酸缺乏后腦組織中 Iba-1 的表達結果，a：與 SHAM，*表示 MCAO+FD 組 DG 區(qū)、CA1 區(qū)和 CA3 區(qū)兩兩比較，）乏對 I/R 大鼠患側海馬區(qū)小膠質細胞中 TNF-α表達的見，SHAM 組在 DG 區(qū)、CA1 區(qū)和 CA3 區(qū)幾乎未見 I，表明 SHAM 組的大鼠大腦海馬區(qū)小膠質細胞幾乎未標陽性細胞數(shù)目相對較多。同時可以明顯看出 MCAO更多陽性細胞的表達。分別對 SHAM 組、MCAO 組A1 區(qū)和 CA3 區(qū) Iba-1/TNF-α陽性細胞數(shù)/DAPI 細胞數(shù)發(fā)現(xiàn)，MCAO 組三個亞區(qū)相對于 SHAM 組該比值增大CAO 組該比值增大，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]小膠質細胞自噬在缺血性腦卒中中作用的研究進展[J]. 王棟,侯博儒,楊文楨,康軍林,任海軍.  中國康復理論與實踐. 2016(12)
[2]葉酸、維生素B12、同型半胱氨酸代謝與腦梗死患者脂質水平、炎癥反應程度的相關性[J]. 丁莉.  海南醫(yī)學院學報. 2017(05)
[3]高血壓人群血清葉酸與炎癥因子的相關性研究[J]. 鄭輻,薛瑤純,李培德,韋柳,趙秀娟,馬靜.  中國熱帶醫(yī)學. 2015(05)
[4]重度癡呆患者和血清維生素B12、葉酸及同型半胱氨酸水平及其相關性研究[J]. 丁仁峰,葉綠素,楊華,郭忠偉.  臨床精神醫(yī)學雜志. 2015(01)
[5]小膠質細胞在缺血性腦卒中的神經保護作用[J]. 李立,吳世政,張淑坤.  實用醫(yī)學雜志. 2014(23)
[6]Enteric glial cells and their role in the intestinal epithelial barrier[J]. Yan-Bo Yu,Yan-Qing.  World Journal of Gastroenterology. 2014(32)
[7]小膠質細胞及免疫相關受體在老年癡呆癥中的作用研究進展[J]. 何曉,孫秉貴.  藥學學報. 2014(06)
[8]葉酸干預對運動人群血漿炎癥因子的影響[J]. 曾榛,張援,王力先,陳嚴,石珊,馬靜.  華南預防醫(yī)學. 2014(02)
[9]葉酸和維生素B12對伴有高同型半胱氨酸血癥腦梗死患者炎癥因子的干預研究[J]. 蘇牟瀟,姚力瑛.  中國醫(yī)藥導報. 2013(26)
[10]健腦安對血管性癡呆大鼠海馬區(qū)IL-1β誘導的c-fos蛋白表達的影響[J]. 時晶,田金洲,朱愛華,尹軍祥,高揚,林嘉友,王永炎.  中國中藥雜志. 2004(06)

博士論文
[1]調節(jié)性T細胞移植對實驗動物腦缺血損傷的保護作用[D]. 李佩盈.復旦大學 2013

碩士論文
[1]Aβ在小膠質細胞中的內吞、轉運和降解的研究[D]. 李佳.廈門大學 2014



本文編號：3095433