第一部分胱硫醚γ裂解酶/硫化氫通路在同型半胱氨酸誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞炎癥中的作用目的:觀察高同型半胱氨酸血癥（hyperhomocysteinemia,HHcy）小鼠模型中炎癥因子、硫化氫（Hydrogen sulfide,H2S）、胱硫醚γ裂解酶（Cystathionineγ-lyase,CSE）的表達(dá)水平,及CSE/H2S通路對(duì)同型半胱氨酸（Homocysteine,Hcy）誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞炎癥的影響。方法:在體實(shí)驗(yàn)以C57BL/6小鼠為研究對(duì)象,用2%（w/v）蛋氨酸飲水建立高同型半胱氨酸血癥模型。C57BL/6小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、蛋氨酸組、蛋氨酸+GYY4137（H2S緩釋劑）組、蛋氨酸+PAG（CSE抑制劑）組。造模兩周后處死動(dòng)物,使用同型半胱氨酸測(cè)定試劑盒檢測(cè)血漿中Hcy濃度;亞甲藍(lán)法檢測(cè)血漿中H2S水平;ELISA檢測(cè)炎癥因子腫瘤壞死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）及白細(xì)胞介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）表達(dá);Quantitative PCR、western blot法分別檢測(cè)小鼠原代腹腔巨噬細(xì)胞CSE m RNA及蛋白... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：96 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

蛋氨酸對(duì)小鼠血漿Hcy、H2S、TNF-α、IL-1β水平及原代腹腔巨噬細(xì)胞中CSEmRNA與蛋白表達(dá)的影響;

氨酸對(duì)小鼠血漿 Hcy、H2S、TNF-α、IL-1β 水平及原代腹腔巨噬細(xì)胞mRNA 與蛋白表達(dá)的影響鼠血漿中 Hcy (A)、H2S (B)、TNF-α (C)、IL-1β (D)水平及原代腹腔 mRNA (E)、蛋白(F)的表達(dá)。18S mRNA 及 GAPDH 蛋白作為內(nèi)參。.01, ***P<0.001 vs control groups，所有數(shù)據(jù)均以 mean ±SEM 表示， H2S 對(duì)蛋氨酸處理的小鼠及 Hcy 處理的 Raw264.7 巨噬細(xì)胞中促炎細(xì)上述結(jié)果的基礎(chǔ)上，為進(jìn)一步研究H2S的下調(diào)是否與輕度高同型半胱促炎細(xì)胞因子上調(diào)有關(guān)，我們分別給蛋氨酸飲食的小鼠注射H2

Y4137和CSE抑制劑PAG。圖2-A,B顯示，GYY4137 (50 mg/kg/day, 皮下注低蛋氨酸處理的小鼠血漿中促炎細(xì)胞因子TNF-α與IL-1β的水平，而PAGkg/day, 皮下注射)則增加蛋氨酸處理的小鼠血漿中促炎細(xì)胞因子TNF-α與平。皮下注射GYY4137與PAG對(duì)蛋氨酸處理小鼠的血漿Hcy水平?jīng)]有影響）。接著我們?cè)谛∈缶奘杉?xì)胞Raw264.7上進(jìn)行結(jié)果的驗(yàn)證。如圖2D-H，我們發(fā)Hcy可減少Raw264.7細(xì)胞中H2S的生成，促進(jìn)TNF-α與IL-1β的生成。H2S緩4137與Hcy共處理，可呈劑量依賴性地改善Hcy誘導(dǎo)的TNF-α與IL-1β的生成酸為H2S合成所需的底物，當(dāng)給予半胱氨酸（1 mM）預(yù)處理，Raw264.7 細(xì)激產(chǎn)生的TNF-α和IL-1β 明顯減少，而該作用能被PAG（1 mM）逆轉(zhuǎn)。在氨酸預(yù)處理情況下，PAG對(duì)Hcy誘導(dǎo)的促炎細(xì)胞因子TNF-α與IL-1β的生成沒響。這些結(jié)果提示在小鼠血漿及巨噬細(xì)胞中CSE-H2S合成的下調(diào)可能參與的促炎細(xì)胞因子的生成。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Hydrogen sulfide ameliorates vascular calcification induced by vitamin D3 plus nicotine in rats[J]. Sheng-ying WU~(2,6) Chun-shui PAN~3 Bin GENG~3 Jing ZHAO~3 Fang YU~3 Yong-zheng PANG~3 Chao-shu TANG~4 Yong-fen QI~(3,4,5) ~2Institute of Cardiovascular Disease,Peking University First Hospital.Beijing 100034 ~3Department of Physiology and Pathophysiology,Peking University Health Science Center,Beijing 100083,China,~4Key Laboratory of Molecular Cardiovascular Science,Ministry of Education,Beijing 100083,China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2006(03)



本文編號(hào)：3092810