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衰老時(shí)心肌肌球蛋白輕鏈激酶(cMLCK)參與調(diào)控心肌收縮力的作用機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-21 08:17
  目的:探究衰老時(shí)心肌肌球蛋白輕鏈激酶(c MLCK)及其下游通路參與調(diào)控心肌收縮力的作用機(jī)制,并通過血管環(huán)張力實(shí)驗(yàn)檢測(cè),旨在揭示衰老時(shí)心肌收縮力與c MLCK表達(dá)及其活性的關(guān)系。方法:23只雄性Wistar大鼠分為兩組,分別飼養(yǎng)至4和30個(gè)月并行心動(dòng)超聲、組織切片、蛋白檢測(cè)、血管環(huán)張力測(cè)試及核酸檢測(cè)等試驗(yàn)。大鼠乳鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng),分為四組:正常對(duì)照組、正常疾病組(缺血缺氧)、衰老組(DOX刺激)和衰老疾病組(DOX+缺血缺氧),實(shí)驗(yàn)后收取細(xì)胞進(jìn)行rt-PCR和蛋白Western blot檢測(cè)。結(jié)果:衰老組(30個(gè)月齡)左室收縮末期內(nèi)徑(LVEDs)、左室舒張末期內(nèi)徑(LVEDd)、收縮末左室后壁厚度(LV PWs)和左室重量(LV mass)相較于年輕組(4個(gè)月齡)增大(all p<0.01)。另外,左室射血分?jǐn)?shù)(EF)及短軸縮短率(FS)在衰老組更低(all p<0.01)。心臟標(biāo)本免疫組化Masson染色提示,衰老組纖維化明顯增加(p<0.01)。蛋白檢測(cè)結(jié)果提示,衰老組c MLCK蛋白較年輕組表達(dá)下降,其下游心肌肌球蛋白輕鏈2(MLC2)的磷酸化在衰老組相應(yīng)降低,... 

【文章來源】:深圳大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】:61 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

衰老時(shí)心肌肌球蛋白輕鏈激酶(cMLCK)參與調(diào)控心肌收縮力的作用機(jī)制研究


左側(cè)為4個(gè)月大鼠心臟,右側(cè)為30個(gè)月4個(gè)月30個(gè)月

心臟,免疫組化,馬松,心室壁


C D圖 2 A 為年輕大鼠心臟切片,B 為衰老大鼠心臟切片,C 為年輕大鼠免疫組化結(jié)果,明顯看到 B 中的心室壁增厚,在馬松染色原肉呈現(xiàn)紅色,從 C 和 D 的結(jié)果中可以看到,D 的藍(lán)色明顯變得多衰老心臟的心肌細(xì)胞數(shù)量少而且不緊密,膠質(zhì)成分多,心肌出現(xiàn) cMLCK 表達(dá)及相關(guān)通路蛋白在衰老心臟中的表達(dá)蛋白免疫印跡結(jié)果顯示:cMLCK 在衰老組表達(dá)量明沒有明顯下降,但是其磷酸化表現(xiàn)出明顯的降低(圖 3)縮力已表現(xiàn)出下降趨勢(shì)。0.60.811.2*0.511.5

磷酸化,心臟


C D圖 2 A 為年輕大鼠心臟切片,B 為衰老大鼠心臟切片,C 為年輕大鼠免疫組化結(jié)果,D 為大鼠免疫組化結(jié)果,明顯看到 B 中的心室壁增厚,在馬松染色原理中,膠原纖維呈現(xiàn)藍(lán)色肉呈現(xiàn)紅色,從 C 和 D 的結(jié)果中可以看到,D 的藍(lán)色明顯變得多而密,紅色則分散疏松,衰老心臟的心肌細(xì)胞數(shù)量少而且不緊密,膠質(zhì)成分多,心肌出現(xiàn)纖維化。 cMLCK 表達(dá)及相關(guān)通路蛋白在衰老心臟中的表達(dá)結(jié)果蛋白免疫印跡結(jié)果顯示:cMLCK 在衰老組表達(dá)量明顯下降,MLC2 總蛋白沒有明顯下降,但是其磷酸化表現(xiàn)出明顯的降低(圖 3)。說明衰老心臟在心縮力已表現(xiàn)出下降趨勢(shì)。11.2*11.5

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]中醫(yī)兒科用藥特點(diǎn)分析[J]. 王蘇莉.  河南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2007(02)
[2]衰老機(jī)制的研究進(jìn)展及應(yīng)用[J]. 付玉榮.  國外醫(yī)學(xué)(老年醫(yī)學(xué)分冊(cè)). 2003(04)

博士論文
[1]HSP27對(duì)心臟衰老的延緩作用及機(jī)制研究[D]. 林圣斕.南京醫(yī)科大學(xué) 2017



本文編號(hào):3092536

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