目的探討麻黃堿及阿托品對(duì)人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞來源心肌細(xì)胞動(dòng)作電位的影響,為人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞來源心肌細(xì)胞的臨床應(yīng)用提供依據(jù)。方法利用免疫熒光鑒定人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞多能性,并利用CHIR99021及IWP-2小分子在體外將其分化為心肌細(xì)胞。利用免疫熒光及膜片鉗對(duì)獲得的心肌細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)及電生理鑒定。隨后通過灌流系統(tǒng)添加500μmol/L麻黃堿及100μmol/L阿托品,并用膜片鉗記錄動(dòng)作電位的變化。結(jié)果人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞高表達(dá)多能性標(biāo)志物oct4、sox2、nanog及tra-1-60。分化得到的心肌細(xì)胞高表達(dá)ctnt、α-actinin、mlc2v等心肌特異性標(biāo)志物,同時(shí)具有自發(fā)節(jié)律的動(dòng)作電位。麻黃堿及阿托品能夠顯著加快自發(fā)動(dòng)作電位的頻率,但對(duì)動(dòng)作電位去極化幅度、最大去極化速率及90%動(dòng)作電位時(shí)程無明顯影響。結(jié)論麻黃堿及阿托品能夠加快人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞來源心肌細(xì)胞自發(fā)動(dòng)作電位的頻率,證明其具有良好的藥物反應(yīng)性。 

【文章來源】：組織工程與重建外科雜志. 2020,16(02)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

hi PSC細(xì)胞核多能性標(biāo)志物oct4、sox2、nanog和細(xì)胞膜多能性標(biāo)志物tra-1-60的表達(dá)

人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞心肌分化過程

圖2 人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞心肌分化過程同樣方法對(duì)hi PSC-CM灌流含100μmol/L阿托品的動(dòng)作電位電極外液。膜片鉗系統(tǒng)顯示，加藥后心肌細(xì)胞自發(fā)節(jié)律性動(dòng)作電位頻率明顯增加(P=0.001)。動(dòng)作電位波形無明顯改變，去極化幅度(APA)、最大去極化速率(d V/dtmax)和90%動(dòng)作電位時(shí)程(APD90)相比加藥前無明顯變化(圖5，表2)。


本文編號(hào)：3091190