目的:溶血磷脂酰膽堿（lysophosphatidylcholine,LPC）是磷脂酶A₂水解磷脂酰膽堿后產(chǎn)生的,是一種可在病理狀態(tài)下產(chǎn)生的具有生物活性的脂質(zhì)。LPC可破壞細胞膜的完整性,并可誘導細胞凋亡。然而,LPC是否可誘導小鼠睪丸間質(zhì)細胞凋亡,國內(nèi)外未見相關報道。本課題主要通過體外細胞實驗探討LPC對小鼠睪丸間質(zhì)細胞凋亡的影響,同時觀察自噬在LPC誘導小鼠睪丸間質(zhì)細胞凋亡中的作用。方法:用MTT法檢測LPC對小鼠睪丸間質(zhì)TM3細胞活性的影響;用氧化應激檢測試劑盒檢測LPC對小鼠睪丸間質(zhì)TM3細胞氧化應激的影響;分別用Western blot和Annexin V-FITC/PI雙染色法檢測LPC對小鼠睪丸間質(zhì)TM3細胞凋亡的影響;用Western blot檢測LPC對小鼠睪丸間質(zhì)TM3細胞自噬的影響。結果:用不同濃度的LPC（0,2.5,5,10,20,40,80,160μM）處理小鼠睪丸間質(zhì)TM3細胞48 h,MTT結果顯示,2.5,5和10μM濃度的LPC可顯著抑制TM3細胞活性,而20,40,80,160μM濃度的LPC抑制TM3細胞活性則更顯著（P&l... 

【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

LPC對小鼠睪丸間質(zhì)TM3細胞活性的影響

第 3 章 結果的 TM3 細胞接種至 10 cm 細胞培養(yǎng)皿中，在培養(yǎng) 24 h 使細胞處于對數(shù)生長期后，分別用 0, 2.5, 5, 10 μM 濃度的 LPC 作用細胞 48 h ，然后用細胞刮收集細胞并制成蛋白樣品，用 Western blot 檢測小鼠睪丸間質(zhì) TM3 細胞內(nèi)凋亡相關蛋白 Bax、Caspase-3、Caspase-8 和 Bcl-2 的表達。結果顯示，LPC 處理組中的 Bax、cleavedCaspase-3 和 cleaved Caspase-8 蛋白表達顯著增加，Bcl-2 蛋白含量則顯著下降；以上結果表明，LPC 可誘導小鼠睪丸間質(zhì) TM3 細胞凋亡。（圖 2）

圖 3. LPC 對小鼠睪丸間質(zhì) TM3 細胞凋亡的影響. Effect of LPC on apoptosis of mouse Leydig TM3 cells. TM3 cells w), 2.5 (b), 5 (c), 10 (d) μM LPC for 48 h; then the annexin V-FITC（+）/P（I+）+）/PI（-） cells were counted by flow cytometry.PC 誘導小鼠睪丸間質(zhì) TM3 細胞產(chǎn)生氧化應激了明確 LPC 是否可使小鼠睪丸間質(zhì) TM3 細胞產(chǎn)生氧化應激，同濃度的 LPC（0, 2.5, 5, 10 μM）處理 TM3 細胞 48 h 后，收集激試劑盒檢測細胞內(nèi)谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）的含 GSH-PX 和 SOD 的活性。與對照組相比，LPC 呈濃度依賴式地 含量，并增加 MDA 含量；LPC 還呈濃度依賴式地降低細胞內(nèi) 活性（圖 4）。以上結果表明，LPC 可誘導小鼠睪丸間質(zhì)細胞產(chǎn)

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3088421