目的肺炎克雷伯菌是一類引起院內(nèi)感染的常見條件致病菌。Rcs系統(tǒng)是肺炎克雷伯菌中一個重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)控系統(tǒng),可參與調(diào)控肺炎克雷伯菌中多種毒力因子的轉(zhuǎn)錄,如莢膜多糖相關(guān)基因。本研究從NTUH-2044全基因組中篩選出7個與莢膜多糖相關(guān)的候選基因（rmpA、manB、wcaJ、wcaI、wcaG、gmd、magA）,旨在探討肺炎克雷伯菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控子RcsAB與7個候選基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控關(guān)系。方法本實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)利用基因芯片技術(shù),完成了在肺炎克雷伯菌NTUH-K2044全基因組中RcsA、RcsB、RcsAB靶基因的篩選,在此基礎(chǔ)上,結(jié)合文獻(xiàn)綜述,共挑選了7個與莢膜多糖相關(guān)的候選基因（rmpA、manB、wcaJ、wcaI、wcaG、gmd、magA）為本實(shí)驗(yàn)的研究對象。使用RT-qPCR實(shí)驗(yàn)與基因芯片結(jié)果相對照,初步判斷7個候選基因與RcsA、RcsB、RcsAB的正負(fù)調(diào)控關(guān)系;然后使用LacZ報(bào)告基因融合實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定RcsA、RcsB、RcsAB與7個候選基因的正負(fù)調(diào)控關(guān)系;再使用EMSA實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證RcsAB與7個候選基因之間是否可以直接結(jié)合,以確定RcsAB與7個候選基因之間存在直接或間接的調(diào)控關(guān)系。... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

菌株總RNA電泳圖

RcsA、RcsB、RcsAB轉(zhuǎn)錄調(diào)控wcaG、gmd、magA的RT-qPCR和lacZ報(bào)告基因融合實(shí)驗(yàn)結(jié)果

純化RcsA蛋白的SDS-PAGE電泳Fig6SDS-PAGEelectrophoresisofpurifiedRcsAprotein

【參考文獻(xiàn)】：
碩士論文
[1]基因芯片技術(shù)探究肺炎克雷伯菌RcsAB的轉(zhuǎn)錄譜[D]. 蘇克文.重慶醫(yī)科大學(xué) 2018
[2]肺炎克雷伯菌RcsAB對菌株超粘性與生物膜的影響[D]. 周錫鵬.重慶醫(yī)科大學(xué) 2016



本文編號：3077795