發(fā)布時(shí)間：2021-03-04 04:12

　　目的:探討miRNA-214對(duì)阿霉素相關(guān)大鼠心肌損傷的保護(hù)作用及其相關(guān)機(jī)制。方法:SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、阿霉素心肌損傷模型組（模型組）和miRNA-214轉(zhuǎn)染組;用超聲心動(dòng)圖檢測(cè)3組大鼠心功能相關(guān)指標(biāo);用PCR檢測(cè)3組大鼠心肌細(xì)胞miRNA-214的表達(dá)差異;用免疫印跡檢測(cè)心肌組織鈣網(wǎng)蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果:miRNA-214轉(zhuǎn)染組全心質(zhì)量、左心室質(zhì)量顯著高于模型組,但低于對(duì)照組;miRNA-214轉(zhuǎn)染組全心肥厚指數(shù)、左心室肥厚指數(shù)顯著低于模型組,但高于對(duì)照組。miRNA-214轉(zhuǎn)染組心肌纖維破壞程度較模型組顯著減輕,肌纖維完整,橫紋排列整齊,有少許中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)與無(wú)空泡變性。miRNA-214轉(zhuǎn)染組大鼠心肌細(xì)胞中miRNA-214相對(duì)表達(dá)量顯著高于模型組,但低于對(duì)照組。miRNA-214轉(zhuǎn)染組谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶、肌酸激酶、B型利鈉肽水平顯著低于模型組,但高于對(duì)照組。miRNA-214轉(zhuǎn)染組左心室收縮末期內(nèi)徑、左心室舒張末期內(nèi)徑顯著低于模型組,但高于對(duì)照組;miRNA-214轉(zhuǎn)染組左心室短軸縮短率、左心室射血分?jǐn)?shù)顯著高于模型組,但低于對(duì)照組。miRNA-214轉(zhuǎn)染組鈣網(wǎng)... 

【文章來(lái)源】：解剖學(xué)雜志. 2020,43(04)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【部分圖文】：

3組大鼠體質(zhì)量變化.

本研究對(duì)大鼠一般狀況及體質(zhì)量進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，結(jié)果顯示對(duì)照組大鼠一般狀況良好，進(jìn)食飲水正常，無(wú)死亡情況發(fā)生。相較于模型組，miRNA-214轉(zhuǎn)染組表現(xiàn)出可有效緩解其不良狀態(tài)，并且出現(xiàn)不良癥狀的時(shí)間較模型組晚，進(jìn)食量及飲水量略高于模型組。實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)結(jié)果顯示，miRNA-214轉(zhuǎn)染組miRNA-214的表達(dá)水平比對(duì)照組僅模型組大鼠明顯升高。本研究成功使得miRNA-214在小鼠心中過(guò)表達(dá)，過(guò)表達(dá)能夠誘導(dǎo)小鼠心肌肥厚，并導(dǎo)致心功能受損，這與已有研究結(jié)果一致[9-10]。另外，miRNA-214的過(guò)度表達(dá)可逆轉(zhuǎn)缺陷心室肌細(xì)胞的增殖低下，大鼠miRNA-214的靶向缺失會(huì)出現(xiàn)異常的心形態(tài)。當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)心肌損傷狀況后，心肌細(xì)胞增殖受阻，可能會(huì)影響其他miRNA的表達(dá)，從而出現(xiàn)某類型miRNA表達(dá)量下降；從另一個(gè)角度來(lái)說(shuō)，如果刺激相應(yīng)類型miRNA的過(guò)表達(dá)，可能會(huì)在一定程度上抑制心肌細(xì)胞的增殖[11]。另一方面，本研究通過(guò)腺病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)構(gòu)建心肌細(xì)胞高表達(dá)miRNA-214的大鼠模型。通過(guò)超聲心動(dòng)圖檢查顯示，模型組大鼠的LVSD、LVDD顯著高于對(duì)照組及轉(zhuǎn)染組，LVFS、LVEF明顯較低，提示大鼠以左心室結(jié)構(gòu)擴(kuò)張、收縮功能下降為主，表明模型構(gòu)建初步成功。同時(shí)，對(duì)大鼠心進(jìn)行稱重后顯示，模型組的全心質(zhì)量、左心室質(zhì)量最低，全心肥厚指數(shù)、左心室肥厚指數(shù)最高，miRNA-214轉(zhuǎn)染組次之。出現(xiàn)上述結(jié)果可能歸因于miRNA-214以組織特異性方式表達(dá)，并在組織發(fā)育和許多生物過(guò)程中起關(guān)鍵作用。miRNA負(fù)責(zé)細(xì)胞表觀基因組的改變，能夠在轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)基因表達(dá)。最近研究表明，miRNA和其他表觀遺傳因子可以相互調(diào)節(jié)或協(xié)同調(diào)節(jié)幾種生物過(guò)程[12]。許多實(shí)驗(yàn)研究已經(jīng)證明鈣網(wǎng)蛋白可以調(diào)節(jié)多種類型細(xì)胞或疾病狀態(tài)中的miRNA表達(dá)[13]，另一方面，mi RNA可以直接靶向表觀遺傳因子，例如DNA甲基轉(zhuǎn)移酶或鈣網(wǎng)蛋白，從而調(diào)節(jié)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)，并有效調(diào)控miRNA與其他表觀遺傳機(jī)制之間的協(xié)調(diào)行動(dòng)，以加強(qiáng)miRNA-214基因表達(dá)[14]。鈣網(wǎng)蛋白是一種進(jìn)化上高度保守的多功能蛋白質(zhì)，蛋白在腫瘤細(xì)胞，凋亡的細(xì)胞，一些藥物處理的細(xì)胞（如蒽環(huán)類藥物）的表面表達(dá)量要多于正常的細(xì)胞[15]。研究者通過(guò)在體實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，缺血預(yù)處理可增加大鼠心臟梗死邊緣區(qū)心肌組織鈣網(wǎng)蛋白的表達(dá)，且其表達(dá)量與梗死面積呈負(fù)相關(guān)[16]。王建禮[17]發(fā)現(xiàn)鈣網(wǎng)蛋白后處理減輕缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的H9c2心肌細(xì)胞死亡、LDH漏出和氧化應(yīng)激程度。本研究免疫印跡檢測(cè)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，模型組鈣網(wǎng)蛋白的表達(dá)量升高；與模型組相比較，轉(zhuǎn)染組中鈣網(wǎng)蛋白的蛋白表達(dá)量顯著減低，表明miRNA-214的過(guò)表達(dá)下調(diào)了鈣網(wǎng)蛋白的表達(dá)，這可能是miRNA-214發(fā)揮心肌保護(hù)作用的機(jī)制之一，后續(xù)工作將探討其生物學(xué)功能及其在心肌損傷保護(hù)中的作用機(jī)制。

3組大鼠心肌組織病理改變，標(biāo)尺=100μm。A：對(duì)照組；B：模型組；C:miRNA-214轉(zhuǎn)染組.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]miRNA,siRNA,saRNA與基因表達(dá)調(diào)控[J]. 黃益玲,王艷林,黃利鳴.  醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志. 2010 (04)

博士論文
[1]鈣網(wǎng)蛋白后處理減輕心肌缺血/再灌注損傷的作用及其機(jī)制研究[D]. 王建禮.中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院 2019
[2]RNA結(jié)合蛋白在基因轉(zhuǎn)錄、剪接及miRNA反饋回路中調(diào)控的信息學(xué)研究[D]. 黃捷.武漢大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3062541