目的建立檢測(cè)重組人抗TNFα單抗制品中CHO宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)（host cell protein,HCP）殘留的夾心ELISA法,并進(jìn)行驗(yàn)證。方法采用二維電泳-Western blot（2D-Western blot）法篩選兔抗CHO HCP多克隆抗體（產(chǎn)品號(hào):AB000103-A、AB000103-C）及羊抗CHO HCP多克隆抗體（批號(hào):3G-0016-PA）中識(shí)別重組人抗TNFα單抗特異性CHO HCP覆蓋率最高的一種作為檢測(cè)抗體,建立檢測(cè)樣品中殘余HCP的夾心ELISA法,并驗(yàn)證方法的線性、基質(zhì)干擾、稀釋線性、靈敏度、精密度及準(zhǔn)確性。結(jié)果以覆蓋率達(dá)57%的AB000103-C號(hào)兔抗CHO HCP多克隆抗體作為檢測(cè)抗體;樣品基質(zhì)干擾HCP檢測(cè),樣品需稀釋6倍;HCP標(biāo)準(zhǔn)品濃度在3. 33～810 ng/mL范圍與A450值曲線擬合良好,R2=1,試驗(yàn)內(nèi)及試驗(yàn)間精密性驗(yàn)證的CV均小于12%,檢測(cè)限及定量限分別為2. 4和20 ng/mL;20、150及300 ng/mL的加標(biāo)樣品回收率分別為99. 5%、97. 1%及100. 3%。結(jié)論成功建立了重組人抗TNFα單抗HCP殘留的夾心... 

【文章來源】：中國生物制品學(xué)雜志. 2020,33(08)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞及樣品
    1.2 主要試劑及儀器
    1.3 HCP標(biāo)準(zhǔn)品的制備
    1.4 CHO HCP多克隆抗體識(shí)別HCP覆蓋率的分析
    1.5 夾心ELISA方法的建立
    1.6 方法的驗(yàn)證
        1.6.1 線性范圍
        1.6.2 基質(zhì)干擾試驗(yàn)
        1.6.3 樣品稀釋線性試驗(yàn)
        1.6.4 靈敏度
        1.6.5精密性
        1.6.6準(zhǔn)確性
2 結(jié)果
    2.1 CHO HCP多克隆抗體識(shí)別HCP的覆蓋率
    2.2 方法的驗(yàn)證
        2.2.1 線性范圍
        2.2.2 基質(zhì)干擾試驗(yàn)
        2.2.3 稀釋線性試驗(yàn)
        2.2.4 靈敏度
        2.2.5 精密性
        2.2.6 準(zhǔn)確性
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]宿主細(xì)胞殘留蛋白質(zhì)對(duì)單克隆抗體藥物質(zhì)量影響及其質(zhì)量控制[J]. 劉國芳,劉曉志,高健,王志明.  中國生物工程雜志. 2019(10)
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本文編號(hào)：3052924