本文關鍵詞：新基因MXRA7的組織學表達及功能研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的基質重建相關分子7(MXRA7),是經生物信息學預測存在的基因,已有越來越多的生物信息學資料如高通量數據證實該基因的存在,但目前對其生物學功能還知之甚少。本課題組應用全基因組表達芯片技術,在研究小鼠角膜炎性損傷后新生血管的病理過程中差異表達基因時,捕捉到了MXRA7基因的變化。本研究擬在生物信息學預測分析和前期實驗數據的基礎上,探究MXRA7基因在小鼠不同組織的表達分布及生物學功能。方法運用現有數據庫資源,用生物信息學方法分析MXRA7基因在小鼠不同組織的表達與生物學功能。引進構建MXRA7基因缺陷小鼠,研究正常野生型小鼠與缺陷小鼠之間的生理學差異。應用熒光實時定量PCR技術(RT-q PCR)檢測MXRA7基因在不同組織中m RNA的表達水平。根據基因的組織表達分布及可能的預測功能,在MXRA7基因野生型與缺陷型小鼠建立不同的疾病模型:耳洞損傷修復模型,Matrigel新生血管模型及主動脈內皮細胞體外誘導成毛細血管網腔模型。結果成功繁育可穩(wěn)定遺傳的MXRA7基因缺陷小鼠。RT-q PCR檢測顯示該基因m RNA在小鼠各主要組織或器官中廣泛表達,表達水平最高的依次為眼睛、肺、腦,表達最低是骨髓。耳洞損傷修復實驗發(fā)現,MXRA7基因缺陷鼠耳洞愈合程度明顯低于野生型鼠,且在耳洞損傷后第13、26、32天的耳洞面積有差異,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05);損傷愈合組織經HE染色后統(tǒng)計分析,兩組小鼠的組織橫截面積相近或無明顯差異;Masson染色分析,缺陷型小鼠耳洞愈合組織結締組織較野生型致密,愈合組織血管分析顯示野生型小鼠微血管密度高于缺陷型。Matrigel膠體內成毛細血管實驗顯示,野生型組小鼠Matrigel膠體內血管密度、紅細胞數量明顯高于缺陷鼠組。主動脈內皮細胞體外誘導成毛細血管網腔實驗證明,MXRA7野生型小鼠內皮細胞成管能力優(yōu)于缺陷型。結論實驗研究發(fā)現MXRA7基因在機體廣泛表達,MXRA7基因在損傷修復等胞外基質重建系統(tǒng)中發(fā)揮一定的功能,可能是通過影響胞外基質的代謝,成纖維細胞的遷移和新生血管的生成發(fā)揮作用。
【關鍵詞】：MXRA7 生物信息學 基因缺陷鼠 損傷修復 新生血管
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R3416
【目錄】：

• 摘要2-4
• Abstract4-8
• 引言8-10
• 第一章 材料與方法10-18
• 1.1 實驗材料10-12
• 1.1.1 實驗動物10
• 1.1.2 實驗儀器10-11
• 1.1.3 主要實驗材料與試劑11-12
• 1.2 實驗方法12-18
• 1.2.1 MXRA7基因缺陷鼠鑒定與繁育12-13
• 1.2.1.1 DNA取材12
• 1.2.1.2 PCR及瓊脂糖凝膠電泳鑒定12-13
• 1.2.2 RT-qPCR MXRA7基因mRNA在組織器官水平表達分布13-14
• 1.2.2.1 組織或器官RNA提取13-14
• 1.2.2.2 RNA反轉錄與實時熒光定量反應14
• 1.2.3 耳洞損傷修復模型建立及處理14-16
• 1.2.3.1 耳洞打孔14-15
• 1.2.3.2 耳洞組織固定及HE染色15
• 1.2.3.3 Masson三色染色15-16
• 1.2.4 Matrigel體內新生血管模型16
• 1.2.4.1 模型建立16
• 1.2.4.2 膠體取材拍照16
• 1.2.5 主動脈內皮細胞體外成毛細血管網模型16
• 1.2.5.1 主動脈內皮細胞原代分離培養(yǎng)16
• 1.2.5.2 內皮細胞誘導成毛細血管網16
• 1.2.6 統(tǒng)計學分析16-18
• 第二章 結果18-28
• 2.1 構建MXRA7基因缺陷小鼠基因型鑒定結果18
• 2.2 RT-qPCR檢測各組織器官中MXRA7 mRNA的表達18-19
• 2.3 耳洞損傷模型19-24
• 2.4 Matrigel體內成管實驗結果24-25
• 2.5 主動脈內皮細胞體外誘導成毛細血管網腔實驗25-28
• 討論28-31
• 結論31-32
• References32-34
• 綜述34-46
• 參考文獻44-46
• 攻讀學位期間的研究成果46-47
• 致謝47-48

【相似文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 張璇;肖玉梅;王茹;李東曉;范紅松;張興棟;;淫羊藿苷對膠原支架中軟骨細胞生長及胞外基質分泌的影響[J];中藥藥理與臨床;2010年06期

2 殷彥君,孫品偉,朱曉輝;小鼠胸腺的胞外基質發(fā)育[J];北京醫(yī)科大學學報;1997年04期

3 劉必成,馬坤嶺,葉銀英,劉乃豐,阮雄中;L-精氨酸對人腎系膜細胞增生及胞外基質產生的影響(英文)[J];Acta Pharmacologica Sinica;2001年08期

4 蔡直鋒;李棟;時慶;莊泳;汪大琨;鞠秀麗;;撤除生長因子對間充質干細胞增殖和胞外基質表達的影響[J];臨床血液學雜志;2011年01期

5 陳俊穎;魏泓;;無細胞真皮中幾種蛋白及胞外基質的表達與分布研究[J];中國現代醫(yī)學雜志;2008年13期

6 張偉;陳孝平;項帥;董漢華;張萬廣;;肝臟胞外基質成分參與卵圓細胞介導的肝再生[J];中國普通外科雜志;2009年01期

7 范利梅;唐旭炎;李全利;薛紹禮;陳首慧;;骨髓基質細胞在胞外基質涂層鈦表面的黏附和鋪展[J];中國組織工程研究與臨床康復;2009年21期

8 劉華珍;;源于微生物的小分子免疫調節(jié)劑[J];福建醫(yī)藥雜志;1985年02期

9 賈衛(wèi);張星海;;從細胞生物學角度認識冠狀動脈成形術后的再狹窄[J];心功能雜志;1993年02期

10 賈衛(wèi);張星海;;從細胞生物學角度認識冠狀動脈成形術后的再狹窄[J];心功能雜志;1993年03期

中國重要會議論文全文數據庫 前1條

1 李曉東;黃穎;羅巧潔;;鈦基質表面仿胞外基質涂層的構建和生物學評價[A];2011年全國高分子學術論文報告會論文摘要集[C];2011年

中國碩士學位論文全文數據庫 前4條

1 趙路;新基因MXRA7的組織學表達及功能研究[D];青島大學;2015年

2 嚴潤彬;胞外基質對大鼠骨髓間充質干細胞增殖的影響[D];重慶大學;2005年

3 劉保安;肝癌細胞同步化及其與胞外基質的粘附特性初探[D];重慶大學;2002年

4 汪露;胞外基質對大鼠骨髓間充質干細胞選擇分化的調節(jié)作用[D];重慶大學;2007年

  本文關鍵詞：新基因MXRA7的組織學表達及功能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：304099