本文關(guān)鍵詞：Neurofibromin在癲癇動物模型中的表達(dá)及功能，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分Neurofibromin在癲癇動物模型中的表達(dá)目的：研究Neurofibromin在匹魯卡品癲癇模型大鼠腦組織的時空變化規(guī)律,從而探討與癲癇的相關(guān)性。方法：1、將64只雄性成年的SD大鼠隨機地分為8個組：7個實驗組(各組n=8)和1個正常對照組(n=8)。7個實驗組分別為6小時、24小時、72小時、7天、14天、30天、60天。將7個實驗組的所有大鼠構(gòu)建成氯化鋰-匹羅卡品點燃的顳葉癲癇模型2、分別采用免疫組化,免疫熒光及Western blot技術(shù)檢測Neurofibromin在氯化鋰-匹魯卡品模型大鼠海馬及皮質(zhì)中表達(dá)的時間及空間的變化規(guī)律。結(jié)果：1、免疫組化結(jié)果顯示Neurofibromin在神經(jīng)元胞漿表達(dá),主要在海馬DG區(qū)、CA1、CA2及CA3區(qū)和皮質(zhì)表達(dá)。與對照組相比,可以觀察到實驗組在點燃后6小時、24小時、72小時、1周、2周、1月、2月表達(dá)逐漸增高,其中有顯著差異從1周(P(0.05)開始,在海馬組織中表達(dá)在2月時達(dá)高峰,在皮質(zhì)1月達(dá)高峰,在2月時較1月稍低。2、免疫熒光結(jié)果顯示Neurofibromin在點燃后大鼠海馬及皮質(zhì)神經(jīng)元上表達(dá),而不與神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞共表達(dá)。3、Western blot結(jié)果顯示Neurofibromin在點燃后大鼠海馬及皮質(zhì)中1周時升高具有顯著差異(P0.05),之后逐漸升高,在海馬組織中高峰在2月,而皮質(zhì)中高峰在1月,其表達(dá)規(guī)律與免疫組化所觀察到的結(jié)果一致。結(jié)論：Neurofibromin在癲癇模型大鼠腦組織中神經(jīng)元表達(dá),各個時間點的表達(dá)增加,在海馬及皮質(zhì)均從1周時表達(dá)升高具有顯著差異,在海馬中2月達(dá)高峰,在皮質(zhì)1月達(dá)高峰,提示Neurofibromin可能參與癲癇的發(fā)生發(fā)展。第二部分Neurofibromin在癲癇動物模型痛性發(fā)作中的功能目的：探討Neurofibromin在匹魯卡品癲癇模型大鼠癇性發(fā)作中的功能。方法：1、選取雄性成年SD大鼠32只,隨機分成4個實驗組(各組n=8)：正常對照組、生理鹽水組、空載體組、siRNA組。對生理鹽水組、空載體組及siRNA組的大鼠海馬區(qū)分別注射生理鹽水、空載體Neurofibromin干擾病毒,注射藥物7天后將4個組的所有大鼠腹腔注射氯化鋰-匹羅卡品,然后觀察各組大鼠癇性發(fā)作的潛伏期、持續(xù)時間及發(fā)作頻率變化。2、采用Western blot技術(shù)檢測上述大鼠7天時海馬區(qū)Neurofibromin表達(dá)量變化。結(jié)果：1、各組大鼠癇性發(fā)作的潛伏期變化：對各組大鼠癇性發(fā)作的潛伏期進行統(tǒng)計后結(jié)果為：正常對照組為(20.29±4.23)min、生理鹽水組為(19.25±5.55)min、空載體組為(18.62±6.38)min、siRNA組為(29.00±5.35)min。siRNA組的潛伏期比其他三組明顯延長,差異具有顯著性(P0.05),而其他三組的潛伏期無顯著差異。2、各組大鼠癇性發(fā)作的頻率變化：統(tǒng)計各組大鼠腹腔注射氯化鋰-匹羅卡品后2小時內(nèi)發(fā)作次數(shù)為：正常對照組為16.63次、生理鹽水組為16.79次、空載體組為17.92次、siRNA組為6.86次。siRNA組的發(fā)作頻率較其他三組明顯縮短,差異具有限制性(P0.05),而其他三組發(fā)作頻率無顯著差異。3、各組大鼠癇性發(fā)作的持續(xù)時間變化：對各組大鼠癇性發(fā)(Racine評分為4級及以上)的持續(xù)時間進行統(tǒng)計后結(jié)果為：正常對照組為(22.00±4.69)min、生理鹽水組為(24.29±4.42)min、空載體組為(22.50±3.78)min、siRNA組為(16.29±2.29)min。siRNA組的持續(xù)時間較其他三組明顯縮短,差異具有顯著性(P0.05),而其他三組無顯著差異。4、Western blot結(jié)果顯示在注射藥物7天Neurofibromin在siRNA組蛋白表達(dá)量較其他三組明顯降低,差異具有顯著性(P(0.05),而其他三組蛋白表達(dá)量無顯著差異。結(jié)論：siRNA降低Neurofibromin的表達(dá)后,氯化鋰-匹羅卡品藥物誘發(fā)大鼠癇性發(fā)作的潛伏期延長,持續(xù)時間及發(fā)作頻率縮短。因此Neurofibromin可能誘發(fā)癲癇發(fā)生。
【關(guān)鍵詞】：癲癇 Neurofibromin 大鼠 siRNA干擾
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R742.1;R-332
【目錄】：

• 英漢縮略語對照5-6
• 中文摘要6-10
• ABSTRACT10-14
• 前言14-16
• 第一部分 Neurofibromin在癲癇動物模型中的表達(dá)16-31
• 1 材料與方法16-23
• 2 結(jié)果23-29
• 3 討論29-30
• 4 小結(jié)30-31
• 第二部分 Neurofibromin在癲癇動物模型癇性發(fā)作中的功能31-37
• 1 材料與方法31-32
• 2 結(jié)果32-35
• 3 討論35-36
• 4 小結(jié)36-37
• 全文總結(jié)37-38
• 參考文獻38-44
• 文獻綜述44-50
• 參考文獻47-50
• 致謝50-51
• 攻讀碩士期間發(fā)表的文章51

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳同度,張昌穎;素食大鼠的貧血現(xiàn)象[J];營養(yǎng)學(xué)報;1957年04期

2 陳偉強;趙善廣;;自制注射用大鼠固定裝置[J];上海實驗動物科學(xué);1992年04期

3 肖柳英,林培英,馮昭明,張丹;不同周齡的SD大鼠生理、生化及體重的正常值測定[J];中藥新藥與臨床藥理;1996年03期

4 李淑云;簡易大鼠灌胃器的制作[J];錦州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2001年04期

5 楊明智,陳積圣;一種大鼠抓取與固定的新工具介紹[J];上海實驗動物科學(xué);2001年03期

6 戴英,陸群;復(fù)方H_(505)對Wistar大鼠外周血的血液流變學(xué)指標(biāo)的影響[J];中國血液流變學(xué)雜志;2001年01期

7 韋應(yīng)波,孫喜慶,曹新生,姚永杰,馮岱雅,楊長斌;+Gz暴露時間對大鼠記憶功能和行為的影響[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2003年01期

8 呂學(xué)軍,郭俊生,李敏,周利梅,張永娟;暈船大鼠體內(nèi)鐵含量的變化[J];中國職業(yè)醫(yī)學(xué);2003年04期

9 湯仁仙,王迎偉,王慧,周峰;201A中藥合劑對大鼠抗腎小球基底膜腎炎病變的影響[J];徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2003年06期

10 孫同柱,付小兵,翁立新,梁雪梅,陳偉;介紹一種簡易的大鼠保定方法[J];上海實驗動物科學(xué);2004年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 尹音;孫振宇;胡敏;李冬霞;;持續(xù)性高正加速度對大鼠顳頜關(guān)節(jié)損傷的作用[A];第八屆全國顳下頜關(guān)節(jié)病學(xué)及（牙合）學(xué)大會論文匯編[C];2011年

2 祝~=驤;iJ梊霞;洃克琴;崔素英;文允摪;

本文編號：304013