海分枝桿菌分泌蛋白的篩選及其對巨噬細(xì)胞功能的影響
發(fā)布時(shí)間:2021-02-09 10:20
結(jié)核分枝桿菌能夠逃避宿主細(xì)胞的免疫防御并在宿主細(xì)胞內(nèi)長期潛伏,是結(jié)核病難以被檢測和治療的根本原因。結(jié)核分枝桿菌的分泌蛋白是其與宿主細(xì)胞相互作用的重要媒介,在結(jié)核分枝桿菌的感染、復(fù)制、存活、潛伏等方面發(fā)揮著重要的作用。為了闡明結(jié)核分枝桿菌的致病機(jī)制及免疫逃逸機(jī)制,本文通過篩選模式生物海分枝桿菌的分泌蛋白,研究其分泌蛋白影響巨噬細(xì)胞免疫應(yīng)答的功能作用,主要結(jié)果如下:(1)通過蛋白質(zhì)組學(xué)測定海分枝桿菌上清濾液蛋白,得到356個(gè)響應(yīng)雙氧水脅迫的蛋白,821個(gè)響應(yīng)缺鐵脅迫的蛋白,其中201個(gè)蛋白同時(shí)響應(yīng)雙氧水脅迫和缺鐵脅迫;(2)分析蛋白質(zhì)組學(xué)測定結(jié)果,鑒定到204個(gè)蛋白為分泌相關(guān)的蛋白,其中PE/PPE家族蛋白和膜蛋白/跨膜蛋白占據(jù)了大部分的比例,約60%;(3)通過鑒定10個(gè)表達(dá)差異較大的分泌蛋白的功能,發(fā)現(xiàn)MMAR0071既能夠刺激巨噬細(xì)胞TNF-α的轉(zhuǎn)錄,同時(shí)也能夠抑制IL-1β的轉(zhuǎn)錄,其作為轉(zhuǎn)錄因子可能參與了細(xì)胞炎癥反應(yīng)信號通路的調(diào)控;MMAR1515(廣譜應(yīng)激蛋白)和MMAR2272(復(fù)蘇促進(jìn)因子)具有較高的細(xì)胞毒性;...
【文章來源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:74 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
細(xì)菌分泌蛋白的分類Fig.1.3Theclassificationofbacterialsecretoryproteins
(包括 SecA1 和 SecA2)和 Tat 分泌系統(tǒng)是細(xì)菌中普遍存在的,而先發(fā)現(xiàn)于分枝桿菌屬的一類特殊的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng),又叫 VII 型2015)。分枝桿菌基因組上的 VII 型分泌系統(tǒng)有 5 個(gè),并高度同源,分5。ESX-1 是最早發(fā)現(xiàn)的 VII 型分泌系統(tǒng),也是目前驗(yàn)證底物最多的分泌系統(tǒng)的組分通常包括 ESAT-6/CFP-10 抗原復(fù)合物、FtsK/SpoRv3870 和 Rv3871)、MycP1 蛋白酶以及膜整合蛋白(Rv3877)等白 Rv3877 擁有 10-11 個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域,被認(rèn)為是內(nèi)膜的易位通道蛋蛋白如何在外膜進(jìn)行運(yùn)輸,至今仍是未知(Abdallah et al 2008)。X-1 分泌系統(tǒng)目前已知的工作模式,ESAT-6/CFP-10 抗原復(fù)合物首Rv3871)上,水解 ATP 產(chǎn)生跨膜運(yùn)輸?shù)哪芰浚缓蟊灰孜煌ǖ赖鞍祝ā?
圖 1.5 吞噬體成熟的過程(Poirier andAv-Gay 2015)Fig. 1.5 The process of phagosome maturation (Poirier and Av-Gay 2015)(2)細(xì)胞骨架重建。細(xì)胞骨架作為貫穿整個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞器,參與了真核細(xì)胞中重要的生命活動(dòng),不僅能夠維持細(xì)胞形態(tài),還控制著胞內(nèi)小泡和其它細(xì)胞器的和定位,細(xì)胞骨架處于不斷合成和解聚的動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)(Porter 1984,F(xiàn)ischer andler 2015)。細(xì)菌分泌蛋白能夠和細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白相互作用,從而調(diào)控細(xì)胞骨架建過程。例如,沙門氏菌 SifA 蛋白能夠結(jié)合宿主 SKIP 蛋白,從而抑制驅(qū)動(dòng)蛋Kinesin)招募到吞噬體膜的表面,也就抑制了吞噬體的轉(zhuǎn)運(yùn)和移動(dòng),從而有利門氏菌在巨噬細(xì)胞內(nèi)存活(Boucrot et al 2005)。(3)裂解吞噬體膜。例如,志賀氏菌 IpaB 蛋白能夠在吞噬體膜上造成孔洞,C 蛋白能夠破壞磷脂雙分子層的完整性,兩者都會(huì)導(dǎo)致吞噬體膜的裂解,從而將釋放到胞質(zhì)中,有利于細(xì)菌的擴(kuò)散(Blocker et al 1999)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]結(jié)核分枝桿菌毒力相關(guān)因子的研究進(jìn)展[J]. 王雙雙,曾范利,李東,宗穎,時(shí)坤,李健明,趙丹,杜銳. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2018(06)
[2]新型抗結(jié)核藥及其候選藥物的研究進(jìn)展[J]. 許紅霞,楊少輝,邢健昆. 中國藥房. 2015(04)
[3]分枝桿菌枝菌酸合成及其調(diào)控[J]. 羅紅麗,龐蕾,謝建平. 微生物學(xué)報(bào). 2012(02)
[4]海分枝桿菌mas基因的功能研究[J]. 朱江化,于佳,高謙. 微生物與感染. 2007(03)
[5]抗結(jié)核藥物的作用機(jī)制及結(jié)核分枝桿菌的耐藥機(jī)理(英文)[J]. 張穎,徐順清,李傳友. 中國抗生素雜志. 2004(12)
博士論文
[1]結(jié)核分枝桿菌新型疫苗的構(gòu)建及免疫學(xué)評價(jià)[D]. 寇一鳴.吉林大學(xué) 2018
[2]腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞抗結(jié)核分枝桿菌感染的分子機(jī)制及結(jié)核分枝桿菌跨越血腦屏障體外模型的初步研究[D]. 陳西.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]結(jié)核分枝桿菌分泌性效應(yīng)分子的鑒定、功能與信號傳遞研究[D]. 李武.西南大學(xué) 2015
[4]海分枝桿菌細(xì)胞壁毒力成分分離鑒定及功能研究[D]. 董丹丹.復(fù)旦大學(xué) 2011
[5]海分枝桿菌致病基因的分離鑒定及功能研究[D]. 于佳.復(fù)旦大學(xué) 2010
本文編號:3025486
【文章來源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:74 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
細(xì)菌分泌蛋白的分類Fig.1.3Theclassificationofbacterialsecretoryproteins
(包括 SecA1 和 SecA2)和 Tat 分泌系統(tǒng)是細(xì)菌中普遍存在的,而先發(fā)現(xiàn)于分枝桿菌屬的一類特殊的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng),又叫 VII 型2015)。分枝桿菌基因組上的 VII 型分泌系統(tǒng)有 5 個(gè),并高度同源,分5。ESX-1 是最早發(fā)現(xiàn)的 VII 型分泌系統(tǒng),也是目前驗(yàn)證底物最多的分泌系統(tǒng)的組分通常包括 ESAT-6/CFP-10 抗原復(fù)合物、FtsK/SpoRv3870 和 Rv3871)、MycP1 蛋白酶以及膜整合蛋白(Rv3877)等白 Rv3877 擁有 10-11 個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域,被認(rèn)為是內(nèi)膜的易位通道蛋蛋白如何在外膜進(jìn)行運(yùn)輸,至今仍是未知(Abdallah et al 2008)。X-1 分泌系統(tǒng)目前已知的工作模式,ESAT-6/CFP-10 抗原復(fù)合物首Rv3871)上,水解 ATP 產(chǎn)生跨膜運(yùn)輸?shù)哪芰浚缓蟊灰孜煌ǖ赖鞍祝ā?
圖 1.5 吞噬體成熟的過程(Poirier andAv-Gay 2015)Fig. 1.5 The process of phagosome maturation (Poirier and Av-Gay 2015)(2)細(xì)胞骨架重建。細(xì)胞骨架作為貫穿整個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞器,參與了真核細(xì)胞中重要的生命活動(dòng),不僅能夠維持細(xì)胞形態(tài),還控制著胞內(nèi)小泡和其它細(xì)胞器的和定位,細(xì)胞骨架處于不斷合成和解聚的動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)(Porter 1984,F(xiàn)ischer andler 2015)。細(xì)菌分泌蛋白能夠和細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白相互作用,從而調(diào)控細(xì)胞骨架建過程。例如,沙門氏菌 SifA 蛋白能夠結(jié)合宿主 SKIP 蛋白,從而抑制驅(qū)動(dòng)蛋Kinesin)招募到吞噬體膜的表面,也就抑制了吞噬體的轉(zhuǎn)運(yùn)和移動(dòng),從而有利門氏菌在巨噬細(xì)胞內(nèi)存活(Boucrot et al 2005)。(3)裂解吞噬體膜。例如,志賀氏菌 IpaB 蛋白能夠在吞噬體膜上造成孔洞,C 蛋白能夠破壞磷脂雙分子層的完整性,兩者都會(huì)導(dǎo)致吞噬體膜的裂解,從而將釋放到胞質(zhì)中,有利于細(xì)菌的擴(kuò)散(Blocker et al 1999)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]結(jié)核分枝桿菌毒力相關(guān)因子的研究進(jìn)展[J]. 王雙雙,曾范利,李東,宗穎,時(shí)坤,李健明,趙丹,杜銳. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2018(06)
[2]新型抗結(jié)核藥及其候選藥物的研究進(jìn)展[J]. 許紅霞,楊少輝,邢健昆. 中國藥房. 2015(04)
[3]分枝桿菌枝菌酸合成及其調(diào)控[J]. 羅紅麗,龐蕾,謝建平. 微生物學(xué)報(bào). 2012(02)
[4]海分枝桿菌mas基因的功能研究[J]. 朱江化,于佳,高謙. 微生物與感染. 2007(03)
[5]抗結(jié)核藥物的作用機(jī)制及結(jié)核分枝桿菌的耐藥機(jī)理(英文)[J]. 張穎,徐順清,李傳友. 中國抗生素雜志. 2004(12)
博士論文
[1]結(jié)核分枝桿菌新型疫苗的構(gòu)建及免疫學(xué)評價(jià)[D]. 寇一鳴.吉林大學(xué) 2018
[2]腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞抗結(jié)核分枝桿菌感染的分子機(jī)制及結(jié)核分枝桿菌跨越血腦屏障體外模型的初步研究[D]. 陳西.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]結(jié)核分枝桿菌分泌性效應(yīng)分子的鑒定、功能與信號傳遞研究[D]. 李武.西南大學(xué) 2015
[4]海分枝桿菌細(xì)胞壁毒力成分分離鑒定及功能研究[D]. 董丹丹.復(fù)旦大學(xué) 2011
[5]海分枝桿菌致病基因的分離鑒定及功能研究[D]. 于佳.復(fù)旦大學(xué) 2010
本文編號:3025486
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