發(fā)布時間：2021-01-31 20:46

　　背景:骨髓間充質(zhì)干細胞具備向神經(jīng)元樣細胞分化的潛能,已經(jīng)被列為治療脊髓損傷的首選干細胞,但其分化效率低,尋找一種具有高效誘導(dǎo)能力的因子尤為重要�；谖墨I查閱及課題組研究基礎(chǔ),推測骨形態(tài)發(fā)生蛋白7（bonemorphogeneticprotein7,BMP-7）基因可能在促進骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)元樣細胞分化上發(fā)揮著重要作用。目的:探討骨形態(tài)發(fā)生蛋白7慢病毒載體轉(zhuǎn)染誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)元樣細胞分化的作用。方法:采用全骨髓貼壁法培養(yǎng)SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞,以感染復(fù)數(shù)為50,25,10,1進行LV-GFP轉(zhuǎn)染,轉(zhuǎn)染后3 d在熒光倒置顯微鏡下觀察各組GFP表達情況,確定最佳感染復(fù)數(shù)。取第3代骨髓間充質(zhì)干細胞,分為空白對照組（常規(guī)培養(yǎng)）、LV-GFP組、LV-BMP-7-GFP組,以最佳感染復(fù)數(shù)轉(zhuǎn)染24,48,72,96,120 h后,采用MTT法檢測細胞存活率;轉(zhuǎn)染3 d后,采用免疫細胞化學(xué)實驗檢測神經(jīng)細胞標(biāo)記物神經(jīng)絲蛋白200、突觸素1表達。結(jié)果與結(jié)論:①LV-GFP轉(zhuǎn)染后3 d,感染復(fù)數(shù)為1組未見GFP陽性細胞,感染復(fù)數(shù)為10,25,50組可見GFP陽性細胞,其中感染復(fù)數(shù)為10... 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2020,24(07)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
文章快速閱讀：
文題釋義：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設(shè)計
    1.2 時間及地點
    1.3 材料
        1.3.1 實驗動物
        1.3.2 實驗試劑
        1.3.3 實驗儀器
    1.4 實驗方法
        1.4.1 骨髓間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)[6]
        1.4.2 骨髓間充質(zhì)干細胞鑒定
        1.4.3 確定最佳感染復(fù)數(shù)
        1.4.4慢病毒轉(zhuǎn)染后骨髓間充質(zhì)干細胞存活情況
        1.4.5 免疫細胞化學(xué)實驗檢測神經(jīng)元樣細胞標(biāo)記物神經(jīng)絲蛋白200、突觸素1表達情況
    1.5 主要觀察指標(biāo)
    1.6 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果Results
    2.1 骨髓間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)形態(tài)變化
    2.2 骨髓間充質(zhì)干細胞流式細胞儀檢測結(jié)果
    2.3 慢病毒轉(zhuǎn)染情況
    2.4 不同時間點骨髓間充質(zhì)干細胞存活率
    2.5 轉(zhuǎn)染后細胞形態(tài)學(xué)變化
    2.6神經(jīng)元樣細胞標(biāo)記物神經(jīng)絲蛋白200、突觸素1表達情況
3 討論Discussion


【參考文獻】：
期刊論文
[1]大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)、鑒定及神經(jīng)樣細胞分化[J]. 康湘萍,陳超,梁超,戴薇薇,龔張斌,金國琴.  中國老年學(xué)雜志. 2018(01)
[2]NT-3基因修飾骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療腦梗死及其機制研究[J]. 卞合濤,郝樓,黃衛(wèi).  中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志. 2017 (09)
[3]骨髓間充質(zhì)干細胞在組織工程研究中的應(yīng)用新進展[J]. 榮為為,韓明子,金世柱,李瑞妮,崔承虎.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展. 2017(05)
[4]骨髓間充質(zhì)干細胞在神經(jīng)修復(fù)中的研究進展[J]. 馮燁軍,陳明.  神經(jīng)損傷與功能重建. 2016(05)
[5]Cell transplantation for the treatment of spinal cord injury–bone marrow stromal cells and choroid plexus epithelial cells[J]. Chizuka Ide,Norihiko Nakano,Kenji Kanekiyo.  Neural Regeneration Research. 2016(09)
[6]大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)與鑒定[J]. 李曉峰,趙勁民,蘇偉,崔向榮,羅世興,馬愛國.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2011(10)



本文編號：3011548