目的探討以體外模型誘導(dǎo)M2型巨噬細(xì)胞的可行性方案。方法不同濃度的分化劑PMA體外誘導(dǎo)人單核細(xì)胞株THP-1獲取巨噬細(xì)胞（THP-1-Mφ）,通過(guò)吞菌實(shí)驗(yàn)（在計(jì)數(shù)的基礎(chǔ)上染色后用卡介苗侵染細(xì)胞）觀察THP-1-Mφ的活性。分別用細(xì)胞增殖示蹤熒光探針（CFDA SE）染液標(biāo)記THP-1-Mφ為綠色,Hoechst 33342染液標(biāo)記卡介苗（BCG）為藍(lán)色,在活細(xì)胞工作站下觀察巨噬細(xì)胞的吞噬活性。由于PMA的濃度以及誘導(dǎo)結(jié)束后用含10%血清RPMI 1640孵育細(xì)胞使得細(xì)胞恢復(fù)到對(duì)后續(xù)炎性刺激最佳狀態(tài)的時(shí)間是決定能否在INF-γ、IL-4細(xì)胞因子作用下成功誘導(dǎo)出活化巨噬細(xì)胞M1/M2的關(guān)鍵要素,故比較了誘導(dǎo)結(jié)束后同一孵育時(shí)間不同誘導(dǎo)濃度對(duì)THP-1-Mφ細(xì)胞貼壁率的影響,同時(shí)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)志分子（巨噬細(xì)胞測(cè)CD11b和CD14,M1型巨噬細(xì)胞測(cè)CD16和CD86,M2型巨噬細(xì)胞測(cè)CD206和CD163）摸索分化劑PMA影響后續(xù)巨噬細(xì)胞極化的最佳誘導(dǎo)濃度和誘導(dǎo)結(jié)束后細(xì)胞的孵育時(shí)間。結(jié)果（1）THP-1細(xì)胞在不同誘導(dǎo)劑的刺激作用下可分化為不同形態(tài)貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞。（2）兩染色液標(biāo)記結(jié)果... 

【文章來(lái)源】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

THP-1在誘導(dǎo)劑作用下分化為不同的細(xì)胞（×20）

10-610-510-410-310-210-1100101102The Diuted Concentration圖 2-1 BCG 在不同稀釋濃度下的菌落計(jì)數(shù)Fig. 2-1 BCG colony count of different concentrations（2）BCG 和 THP-1-Mφ 染色相差顯微鏡下可見(jiàn)紅色箭頭所指的是 THP-1-Mφ 細(xì)胞，貼壁生長(zhǎng)，呈類(lèi)圓形，而綠色箭頭所指的 BCG 活菌為短小桿菌，略彎曲（圖 2-2A）。熒光顯微鏡下藍(lán)色熒光是由 Hoechst 33342 標(biāo)記的 BCG，綠色熒光是由 CFDA SE 標(biāo)記的THP-1-Mφ 細(xì)胞，橙色箭頭所指的是 THP-1-Mφ 細(xì)胞吞噬 BCG 后，在細(xì)胞質(zhì)可見(jiàn)藍(lán)色熒光（圖 2-2B）。A B

m工R一122和皿R146a單獨(dú)或組合AUC值

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]佛波酯聯(lián)合脂多糖誘導(dǎo)THP-1炎癥細(xì)胞模型的優(yōu)化及評(píng)價(jià)[J]. 鄒明月,席磊,饒菁菁,景一嫻,廖飛,楊曉蘭.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017(11)
[2]固有免疫功能相關(guān)的microRNAs在布魯氏菌病患者中的表達(dá)情況[J]. 鄭源強(qiáng),于玖軒,韓新榮,石艷春.  中國(guó)免疫學(xué)雜志. 2016(09)



本文編號(hào)：3005369