發(fā)布時(shí)間：2021-01-28 02:58

　　目的獲取樹鼩連接黏附分子A（junctional adhesion molecule A,JAM-A）的全長(zhǎng)編碼序列并進(jìn)行分子特征分析,探討JAM-A作為呼腸孤病毒受體入侵樹鼩原代肺細(xì)胞的作用機(jī)制。方法提取健康樹鼩組織總RNA,采用反轉(zhuǎn)錄PCR和cDNA末端快速克隆技術(shù)獲取JAM-A基因;Unipro UGENE分析編碼氨基酸,使用MEGA 6.0軟件最大似然法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹;實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)JAM-A在樹鼩25個(gè)組織和血液中的表達(dá)分布情況;于樹鼩原代肺上皮細(xì)胞上進(jìn)行受體的特異性抗體阻斷處理,然后采用免疫熒光法觀察病毒抗原對(duì)呼腸孤病毒感染的影響。結(jié)果獲取了JAM-A基因cDNA全長(zhǎng)序列,2 962 bp;系統(tǒng)發(fā)育樹進(jìn)化分析顯示JAM-A基因與人的親緣關(guān)系較嚙齒類更近;JAM-A分子廣泛表達(dá)于樹鼩的外周組織,而在呼吸道和消化道表達(dá)水平更高。特異性抗體作用于細(xì)胞顯著降低病毒抗原的免疫熒光積分吸光度值（P<0.000 1）。結(jié)論首次克隆并分析了JAM-A的基因序列,驗(yàn)證JAM-A分子是呼腸孤病毒入侵樹鼩的主要受體,提示樹鼩可作為一種新的呼腸孤病毒動(dòng)物模型。 

【文章來(lái)源】：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與比較醫(yī)學(xué). 2020,40(03)

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]二株不同基因型樹鼩呼腸孤病毒的分離和鑒定[J]. 劉建生,陶玉芬,李曉菲,李超,李曉飛,孫曉梅,代解杰,劉紅旗.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2015(04)
[2]樹鼩呼腸孤病毒RT-nPCR檢測(cè)方法的建立及初步應(yīng)用[J]. 李曉飛,殷安國(guó),張媛,羅軍,孫曉梅,代解杰.  中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志. 2014(06)
[3]連接黏附分子A的研究進(jìn)展[J]. 周童,仵敏娟.  生命科學(xué). 2013(09)
[4]樹鼩呼腸孤病毒的分離鑒定[J]. 徐娟,黃曉燕,李曉飛,王文廣,殷安國(guó),夏雪山,孫曉梅,代解杰.  動(dòng)物學(xué)研究. 2013(02)
[5]呼腸病毒感染實(shí)驗(yàn)動(dòng)物致病性的研究進(jìn)展[J]. 左庭婷,端青.  軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊. 2008(04)
[6]正呼腸孤病毒及其分類學(xué)依據(jù)研究進(jìn)展[J]. 張?jiān)?劉明,歐陽(yáng)歲東,童光志.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2004(06)



本文編號(hào)：3004233