利用I^-₃與淀粉絡(luò)合所呈現(xiàn)的藍色在一定波長下有特征吸收這一特性,采用可見分光光度法,通過測定添加α-淀粉酶前后發(fā)生水解的淀粉量的變化測定α-淀粉酶活力。結(jié)果表明,淀粉與I^-₃在pH值6.5的磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖溶液中顯色良好,并在580 nm處具有最大吸光度。加入一定量的淀粉,α-淀粉酶濃度（x）在0.001～0.008 mg·mL^-1范圍內(nèi)與酶活力（y）線性關(guān)系良好,標準曲線方程為y=375.75x+0.1208（R²=0.9939）。因此,可以利用碘與淀粉的顯色反應(yīng)對α-淀粉酶活力進行測定。 

【文章來源】：化學(xué)與生物工程. 2020,37(03)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

吸收光譜

根據(jù)Lambert-Beer定律,采用紫外可見分光光度法對物質(zhì)含量進行測定時,吸光度應(yīng)控制在0.2～0.8之間[9],一般不宜超過1.0,否則測定結(jié)果將會產(chǎn)生較大偏差。故而在本實驗中,參照1.3.2項下方法,分別配制不同濃度的淀粉溶液,與過量的碘液充分顯色后測定其吸光度,結(jié)果如圖2所示。由圖2可以看出,當?shù)矸蹪舛仍?.001～0.008 g·mL-1時,淀粉與碘所形成的絡(luò)合物在580 nm處所產(chǎn)生的特征吸收與淀粉濃度呈正相關(guān)性。以淀粉濃度(c)為橫坐標、吸光度(A)為縱坐標繪制標準曲線,得標準曲線方程:A=129.49c+0.0097,R2=0.9962,線性關(guān)系良好。表明淀粉濃度在0.001～0.008 g·mL-1范圍內(nèi),可以利用碘與淀粉的顯色反應(yīng)對淀粉含量進行測定。

從圖3可以看出,當α-淀粉酶濃度在0.001～0.008 mg·mL-1之間時,酶活力(y)與α-淀粉酶濃度(x)線性關(guān)系良好,擬合標準曲線方程為:y=375.75x+0.1208,R2=0.9939。表明α-淀粉酶濃度在0.001～0.008 mg·mL-1范圍內(nèi),可以利用碘與淀粉的顯色反應(yīng)對酶活力進行測定。2.3.3 方法學(xué)考察


本文編號：3004106