利用I^-₃與淀粉絡(luò)合所呈現(xiàn)的藍(lán)色在一定波長(zhǎng)下有特征吸收這一特性,采用可見分光光度法,通過測(cè)定添加α-淀粉酶前后發(fā)生水解的淀粉量的變化測(cè)定α-淀粉酶活力。結(jié)果表明,淀粉與I^-₃在pH值6.5的磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖溶液中顯色良好,并在580 nm處具有最大吸光度。加入一定量的淀粉,α-淀粉酶濃度（x）在0.001～0.008 mg·mL^-1范圍內(nèi)與酶活力（y）線性關(guān)系良好,標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=375.75x+0.1208（R²=0.9939）。因此,可以利用碘與淀粉的顯色反應(yīng)對(duì)α-淀粉酶活力進(jìn)行測(cè)定。 

【文章來(lái)源】：化學(xué)與生物工程. 2020,37(03)

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【部分圖文】：

吸收光譜

根據(jù)Lambert-Beer定律,采用紫外可見分光光度法對(duì)物質(zhì)含量進(jìn)行測(cè)定時(shí),吸光度應(yīng)控制在0.2～0.8之間[9],一般不宜超過1.0,否則測(cè)定結(jié)果將會(huì)產(chǎn)生較大偏差。故而在本實(shí)驗(yàn)中,參照1.3.2項(xiàng)下方法,分別配制不同濃度的淀粉溶液,與過量的碘液充分顯色后測(cè)定其吸光度,結(jié)果如圖2所示。由圖2可以看出,當(dāng)?shù)矸蹪舛仍?.001～0.008 g·mL-1時(shí),淀粉與碘所形成的絡(luò)合物在580 nm處所產(chǎn)生的特征吸收與淀粉濃度呈正相關(guān)性。以淀粉濃度(c)為橫坐標(biāo)、吸光度(A)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程:A=129.49c+0.0097,R2=0.9962,線性關(guān)系良好。表明淀粉濃度在0.001～0.008 g·mL-1范圍內(nèi),可以利用碘與淀粉的顯色反應(yīng)對(duì)淀粉含量進(jìn)行測(cè)定。

從圖3可以看出,當(dāng)α-淀粉酶濃度在0.001～0.008 mg·mL-1之間時(shí),酶活力(y)與α-淀粉酶濃度(x)線性關(guān)系良好,擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:y=375.75x+0.1208,R2=0.9939。表明α-淀粉酶濃度在0.001～0.008 mg·mL-1范圍內(nèi),可以利用碘與淀粉的顯色反應(yīng)對(duì)酶活力進(jìn)行測(cè)定。2.3.3 方法學(xué)考察


本文編號(hào)：3004106