本文關鍵詞：Jnk2通過調節(jié)壓力誘導的線粒體自噬抑制NLRP3炎癥小體的激活，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：NLRP3炎癥小體是一種多蛋白復合物,在臨床上涉及到多種疾病,例如肥胖癥,痛風,阿爾茨海默型老年癡呆和一些自發(fā)性炎癥等。研究報道病理或損傷相關分子模型可以引發(fā)炎癥小體的激活。一旦被激活,NLRP3炎癥小體會馬上活化半胱氨酸蛋白酶Caspase-1,活化的Caspase-1隨即開始剪切促炎癥因子IL18和IL-1??的前體形式使其成熟并開始分泌參與相應的炎癥反應。NLRP3炎癥小體的激活本身是一種免疫監(jiān)管行為,可以修復組織損傷,但是需要注意的是它的失調會引發(fā)嚴重的免疫疾病。因此在臨床治療上我們需要平衡炎癥小體在自主防御,組織修復和超活化所引起的炎癥疾病的關系。目前臨床上的主要治療手段是通過阻斷IL-1??的活化來達到治療目的。大量研究表明NLRP3炎癥小體的激活最主要的三個因素是鉀離子流,溶酶體蛋白酶泄漏和活性氧ROS的積累。而活性氧ROS最主要的來源來自線粒體,最近越來越多的文章證明了線粒體與NLRP3炎癥小體活化之間的關系。線粒體自噬可以通過清除積累的損傷線粒體和過多的活性氧ROS來減緩炎癥小體的活化。在這篇文章中,我們發(fā)現(xiàn)小鼠胚胎成纖維Jnk2基因缺陷型細胞存在過多的細胞自噬活性,這種活性消耗了過多的線粒體自噬轉換蛋白p62。p62是裝配線粒體自噬的必要蛋白。當Jnk2基因缺陷型細胞遭遇細胞壓力或外界刺激時,過少的p62會導致其無法通過誘導線粒體自噬來清理損傷的線粒體,從而積累過多的損傷線粒體以及線粒體損傷積累產生的ROS,引發(fā)炎癥小體的激活。在內毒素LPS誘導的敗血病休克小鼠模型中,腹腔注射LPS會導致Jnk2基因缺陷型小鼠誘發(fā)過多的NLRP3炎癥小體活性,分泌大量促炎癥因子IL18和IL-1?從而導致其存活時間顯著縮短。總的來說,我們的研究闡述了Jnk2可以通過對線粒體的質量控制來抑制炎癥小體超活化的調控機制。在臨床上,該調控機制可以為減輕NLRP3炎癥小體活化引起的自身性炎癥疾病提供潛在的藥物靶點。
【關鍵詞】：Jnk2 線粒體自噬 p62 NLRP3炎癥小體
【學位授予單位】：浙江理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R364.5
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 1、研究背景8-15
• 1.1 NLRP3炎癥小體8-9
• 1.2 線粒體自噬9-10
• 1.3 轉換蛋白p6210-12
• 1.4 c-Jun蛋白氮末端激酶Jnk12-14
• 1.5 研究目的與意義14-15
• 2、實驗材料與方法15-28
• 2.1 實驗材料15-16
• 2.1.1 實驗試劑15-16
• 2.1.2 小鼠16
• 2.1.3 si RNA序列16
• 2.2 實驗方法16-28
• 2.2.1 Western blot16-18
• 2.2.2 免疫熒光18-19
• 2.2.3 Multiplex immunoassay19-21
• 2.2.4 RNA抽提21-22
• 2.2.5 質粒和si RNA的轉染22-23
• 2.2.6 細胞培液上清沉淀23
• 2.2.7 RT-QPCR23-24
• 2.2.8 Lentivirus感染24
• 2.2.9 In vivo實驗24
• 2.2.10 細胞因子分析24
• 2.2.11 分離和培養(yǎng)小鼠骨髓來源巨噬細胞(BMDMs)24-26
• 2.2.12 炎癥小體活性分析26
• 2.2.13 線粒體ROS水平測量26
• 2.2.14 透射電子顯微鏡26
• 2.2.15 穩(wěn)定細胞系的建立26-27
• 2.2.16 熒光顯微鏡27-28
• 3、實驗結果28-40
• 3.1 Jnk2參與壓力誘導的線粒體自噬作用的調節(jié)28-30
• 3.2 Jnk2蛋白維持自噬轉換蛋白p62的穩(wěn)態(tài)表達水平30-32
• 3.3 穩(wěn)態(tài)水平下Jnk2蛋白抑制了過量的細胞自噬活性32-34
• 3.4 Jnk2抑制炎癥小體的活性34-38
• 3.5 Jnk2蛋白不影響紅細胞的成熟38-40
• 4、討論40-43
• 5、結論43-44
• 參考文獻44-49
• 攻讀學位期間的研究成果49-50
• 致謝50-51

【共引文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 胡堅;楊閏平;汶春苗;李恒進;趙華;;NLRP3炎癥小體在咪喹莫特誘導小鼠銀屑病樣模型中的表達及芥菜籽對其的影響[J];南方醫(yī)科大學學報;2013年09期

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5 趙U

本文編號：299670