目的:探討肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2（MEF2）在Rho信號通路調(diào)控去極化誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞分化過程中的角色。方法:原代培養(yǎng)小鼠門靜脈血管平滑肌細(xì)胞,采用免疫熒光、Western blotting、實時熒光定量RT-PCR及siRNA技術(shù),檢測高鉀去極化刺激下RhoA蛋白胞膜移位情況、LIM激酶（LIMK）和絲切蛋白2（cofilin-2）的磷酸化水平,以及MEF2四種亞型、心肌素（myocardin）以及平滑肌蛋白22α（SM22α）的mRNA表達(dá)水平。結(jié)果:高鉀去極化30 s后RhoA即發(fā)生胞膜移位,而LIMK和絲切蛋白2蛋白磷酸化分別在10 min和30 min達(dá)到峰值,分別增加42.20%和32.75%（均P<0.01）。高鉀刺激24 h后MEF2A和2D的mRNA表達(dá)分別增加47.63%（P<0.05）和48.15%（P<0.01）。沉默MEF2A/2D后,心肌素的表達(dá)不再對去極化敏感,但SM22α的mRNA表達(dá)不受影響。結(jié)論:MEF2A/2D通過調(diào)控心肌素參與了Rho信號通路調(diào)控去極化誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞分化過程。 

【文章來源】：中國病理生理雜志. 2013,29(03)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
材 料 和 方 法
    1 動物與試劑
    2 方法
        2.1 門靜脈血管平滑肌細(xì)胞的原代培養(yǎng)
        2.2 免疫組化
        2.3 Western blotting 檢測蛋白質(zhì)表達(dá)
        2.4 siRNA轉(zhuǎn)染及實時熒光定量RT-PCR檢測mRNA表達(dá)
    3 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié) 果
    1 高鉀去極化刺激小鼠門靜脈VSMCs激活RhoA
    2 高鉀去極化刺激對LIMK和cofilin-2磷酸化的影響
    3 高鉀去極化刺激小鼠門靜脈VSMCs對轉(zhuǎn)錄因子心肌素及平滑肌標(biāo)志物mRNA表達(dá)的影響
    4 高鉀去極化刺激小鼠門靜脈VSMCs對MEF2四種亞型mRNA表達(dá)的影響
    5 高鉀去極化刺激對沉默MEF2A和MEF2D的VSMCs心肌素和SM22α mRNA表達(dá)的影響
討 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人Gax基因轉(zhuǎn)染對血管平滑肌細(xì)胞增殖、遷移和細(xì)胞周期的影響[J]. 鄭輝,薛松,連鋒,胡振雷,汪永義.  中國病理生理雜志. 2012(02)



本文編號：2994492