目的:探討肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2（MEF2）在Rho信號(hào)通路調(diào)控去極化誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞分化過(guò)程中的角色。方法:原代培養(yǎng)小鼠門(mén)靜脈血管平滑肌細(xì)胞,采用免疫熒光、Western blotting、實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR及siRNA技術(shù),檢測(cè)高鉀去極化刺激下RhoA蛋白胞膜移位情況、LIM激酶（LIMK）和絲切蛋白2（cofilin-2）的磷酸化水平,以及MEF2四種亞型、心肌素（myocardin）以及平滑肌蛋白22α（SM22α）的mRNA表達(dá)水平。結(jié)果:高鉀去極化30 s后RhoA即發(fā)生胞膜移位,而LIMK和絲切蛋白2蛋白磷酸化分別在10 min和30 min達(dá)到峰值,分別增加42.20%和32.75%（均P<0.01）。高鉀刺激24 h后MEF2A和2D的mRNA表達(dá)分別增加47.63%（P<0.05）和48.15%（P<0.01）。沉默MEF2A/2D后,心肌素的表達(dá)不再對(duì)去極化敏感,但SM22α的mRNA表達(dá)不受影響。結(jié)論:MEF2A/2D通過(guò)調(diào)控心肌素參與了Rho信號(hào)通路調(diào)控去極化誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞分化過(guò)程。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)病理生理雜志. 2013,29(03)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
材 料 和 方 法
    1 動(dòng)物與試劑
    2 方法
        2.1 門(mén)靜脈血管平滑肌細(xì)胞的原代培養(yǎng)
        2.2 免疫組化
        2.3 Western blotting 檢測(cè)蛋白質(zhì)表達(dá)
        2.4 siRNA轉(zhuǎn)染及實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)mRNA表達(dá)
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
    1 高鉀去極化刺激小鼠門(mén)靜脈VSMCs激活RhoA
    2 高鉀去極化刺激對(duì)LIMK和cofilin-2磷酸化的影響
    3 高鉀去極化刺激小鼠門(mén)靜脈VSMCs對(duì)轉(zhuǎn)錄因子心肌素及平滑肌標(biāo)志物mRNA表達(dá)的影響
    4 高鉀去極化刺激小鼠門(mén)靜脈VSMCs對(duì)MEF2四種亞型mRNA表達(dá)的影響
    5 高鉀去極化刺激對(duì)沉默MEF2A和MEF2D的VSMCs心肌素和SM22α mRNA表達(dá)的影響
討 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人Gax基因轉(zhuǎn)染對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖、遷移和細(xì)胞周期的影響[J]. 鄭輝,薛松,連鋒,胡振雷,汪永義.  中國(guó)病理生理雜志. 2012(02)



本文編號(hào)：2994492