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人源性長(zhǎng)壽保障基因2對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-01-22 22:08
  目的探討沉默人源性長(zhǎng)壽保障基因2(LASS2)基因?qū)χ嗵牵↙PS)誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞活力、凋亡及核轉(zhuǎn)錄因子kappaB(NF-κB)信號(hào)通路的影響。方法將大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤(PC12)細(xì)胞分為4組:空白組(無任何處理)、LPS組(200μg·mL-1 LPS處理PC12細(xì)胞)、LPS+NC組(轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照siRNA質(zhì)粒后用200μg·mL-1LPS處理)、LPS+si-LASS2組(轉(zhuǎn)染LASS2的特異性siRNA質(zhì)粒后用200μg·mL-1LPS處理)。以蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)LASS2、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)和環(huán)氧化酶-2(COX-2)蛋白表達(dá)。細(xì)胞檢測(cè)試劑盒-8和流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)細(xì)胞活力(OD值)與凋亡率。活性氧(ROS)試劑盒檢測(cè)ROS含量(相對(duì)熒光強(qiáng)度)。結(jié)果空白組、LPS組、LPS+NC組、LPS+si-LASS2組的LASS2蛋白相對(duì)表達(dá)量分別為0.11±0.01,0.80±0.07,0.79±0.06和0.16±0.02;... 

【文章來源】:中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志. 2020,36(02)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】:4 頁(yè)

【文章目錄】:
材料與方法
    1 材料
        細(xì)胞
        試劑
        儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)[5]
        2.2 分組與處理[3]
        2.3 以蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)LASS2、p-NF-κB、Cleaved caspase-3和COX-2蛋白表達(dá)水平[6]
        2.4 以CCK-8檢測(cè)細(xì)胞活力[7]
        2.5 以流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率[7]
        2.6 以ROS試劑盒檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS水平[7]
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
    1 幾組PC12細(xì)胞沉默LASS2基因效果比較
    2 經(jīng)LPS刺激PC12細(xì)胞后對(duì)LASS2蛋白相對(duì)表達(dá)量的影響
    3 沉默LASS2表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞活力影響
    4 沉默LASS2表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡和活性氧(ROS)水平的影響
    5 沉默LASS2表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞COX-2蛋白表達(dá)的影響
    6 沉默LASS2表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞p-NF-κB和Cleaved-caspase3表達(dá)的影響
討 論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]肉豆蔻木酚素對(duì)脂多糖激活的小膠質(zhì)細(xì)胞條件培養(yǎng)基對(duì)海馬神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用[J]. 宗堪堪,劉鑫,玄延花,金昱,崔春愛.  中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志. 2019(06)
[2]右美托咪定對(duì)脂多糖刺激后大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞的保護(hù)作用及機(jī)制[J]. 周俊杰,肖偉,何璇,彭娜,童華生,蘇磊.  解放軍醫(yī)學(xué)雜志. 2018(04)
[3]α-細(xì)辛醚對(duì)脂多糖誘導(dǎo)大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響[J]. 徐燕,苗靜琨,劉輝娟,花媛媛,馬倩,李春,包蕾,陳啟雄.  中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志. 2017(02)



本文編號(hào):2993988

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